环氧活化6FF，偶联效率低，怎么办?

1。环氧直接连效率和活性都难保证。2，醛基可以，但是偶联后需要还原，不知道抗体能否不还原。3。溴乙酰活化的6FF连巯基化，做过，但是抗体有多少巯基。如果有的话那连完还是会容易脱落，因为另外一边也是酰胺结构的，一样不算很稳定。4，没怎么做过，但是如果是连醛基化的单抗，那也可以直接选择氨基化的琼脂糖凝胶偶联，或直接选择用戊二醛连抗体个氨基化的琼脂糖凝胶。活化的有的是6FF的。至少我们活化后的都是这样的，流速慢的很少用。其实脱落未必和偶联的有关，有时候也许脱落的是没联结实的假偶联，也就是吸附的，还可能是降解的片段等也都可能，你多用几次后，每次都脱落一样的话那应该是脱落，如果不是也许用几次是不是脱落就少了，总之客户不少用NHS活化填料做免疫亲和，但没有说过脱落这问题，也许没要求那么多吧。

NHS或CNBr活化琼脂糖凝胶，抗体偶联最好选择这两，但是我喜欢前者，因为偶联后酸性条件洗脱会更稳定，有足够长亲和手臂，非特异吸附也小，偶联效率也高。抗体比较贵，最好选择活化好的填料

通常脱落的那些都不会有太大影响，NHS活化非常常用，保持CNbr活化的做成填料工业生产的有的是，所以我觉得其实也许不需要在这问题上花太多工夫，当然做研究另当别论，此外如果涉及到配基选择，那就更烦琐了，不同来源种属虽然有区别，但是我觉得还应该留意的问题是琼脂糖凝胶本身也是会有一些剥落的，这也会导致一些配基脱落。因此只要在可控制的反之，既然脱落不影响载量那就可继续用就好