激酶活性检测及Km值计算？

各位站友：我想请教一下，我们现在做了一个蛋白激酶的酶活鉴定，其可以磷酸化底物发挥作用，我们利用P32标记进行了酶活检测，孵育后进行了SDS-PAGE，然后在磷成像仪下进行了扫描，如何利用获得的胶图来进行Km值计算呢？

多谢各位！！！

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共3个回答

但是得到的图应该是一个相对水平图吧，我要是计算Km的话怎么里计算呢
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Km的单位是浓度，跟你纵坐标的数值是绝对值和相对值没有关系

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灰度图得到条带的数值就可以很浓度作图啦
但是得到的图应该是一个相对水平图吧，我要是计算Km的话怎么里计算呢

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灰度图得到条带的数值就可以很浓度作图啦

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