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做泛素化降解时,泛素抗体用的哪种?

最近在做A蛋白的泛素化降解,我通过ip用A蛋白拖泛素分子,做wb时,没有发现A蛋白附近有拖带,但是在9kd附近有带,IgG该处无明显条带。看发表文章一般都是目的蛋白大小附近出现ladder状条带。会不会和我用的泛素抗体有关呢?大家一般用的是哪种啊?我用的是上海生工anti-RPS27A, 维基上写:Ubiquitin is encoded in mammals by 4 different genes. UBA52 and RPS27A genes code for a single copy of ubiquitin fused to the ribosomal proteins L40 and S27a, respectively. The UBB and UBC genes code for polyubiquitin precursor proteins。那做泛素化降解是否只能用anti-ubiquitin的抗体呢?我找了几家国产的是anti-ubiquitin B,然后分子量大小都是二十多kd,我就不理解了,ubiquitin不是8.5kd吗?进口抗体到货慢,我也着急所以最好有国产抗体推荐。


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共1个回答
你杂A蛋白了吗,会不会没拖下来
我们用的是santa的anti-ubiquitin,效果还比较稳定,大小是8.5KD样子,wb显出来的是和目的蛋白得结合体,会大些;
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