蛋白诱导表达不出，为什么?

你的种子摇的不一定够。我觉得你可以从甘油管接种到5ml试管，28度过夜，然后测定OD600的吸光值，一般经验是可以达到3－5个OD，可以按照5％转接到二级种子5ml试管，37度培养到OD600＝0.5左右，然后IPTG诱导。你用的IPTG浓度梯度差别不大，不知道你的蛋白溶解性怎么样？是否有可溶表达的报道呢？你可以做一个IPTG浓度梯度的单因素实验，从0.05mM，到1mM，温度25度到30度诱导，4－8h后跑全菌电泳，看看是否有目标蛋白的条带。