1.你的流动相是几元的，如果是多元流动相，超过三元的一般柱子的平衡时间会很长，大约会在半天左右，如果柱子还没有平衡好，就会出现你的这种情况。2. 柱子的冲洗问题也很关键，如果流动相中有盐的成分，每天进血样之后，要先用排气后的超纯水冲洗半小时或以上，再用甲醇或乙腈饱和，这样既省柱子，又可确保峰形重现性好。我用比格犬做过实验，如果单纯血浆峰有差异，你先不用担心，你主要是看检测的药品与血浆峰是否有干扰，血浆峰的大小有可能不同，可能由于采血时是否出现微量的溶血，样品处理之后过虑等都可能产生误差。

本人曾做过血浆的HPLC，首先重复性不好，一个可能原因说明你做的药不稳定，也可能是你的流动相不稳定，最好先配现用。或者还有柱子的问题，是不是新柱子，稳定了没有。如果是别人用过的，是否冲洗干净？方便再换一根柱子，或者再重新摸一下流动相的配比情况，我经验不多，不知帮上忙否？