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柱前AQC衍生HPLC-PAD测氨基酸,两个峰分不开?求助求助!?

AQC柱前衍生分析17种氨基酸氨基酸在20min左右的Arg和Thr无法分开,求高手指教!色谱系统:Waters e2695-2998色谱柱:AccQ?Tag 氨基酸柱(3.9×150mm)流动相A:Waters Elution A (1:10)配制流动相B:乙腈流动相C:高纯水柱温:37℃检测器:PAD (248nm) 梯度条件如下:氨基酸出峰顺序:Asp, Ser, Glu, Gly, His, NH3, Arg, Thr, Ala, Pro, Cys2, Tyr, Val, Met, Lys, Ile, Leu, Phe.[ 来自小组 食品科学 ]
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共6个回答
尝试了19.5-21min之间缓慢洗脱(曲线9),乙腈浓度在10-11之间,依旧无法分来,差不多下班个峰连体。... 您好,我现在在测氨基酸,可不可以问你一些问题,你的东西分得好呀
大概计算了一下Arg和Thr的乙腈洗脱浓度都处在10-11%之间,不知如何增加区间?... 延长时间吧,比如:原先是5min从10%达到20%,改为10min从10%达到20%。
两个分不开的氨基酸出峰时间处于20-22min,所以,延长第4和5步(即18-29min)的时间,也可以增加一个时间区域,把溶液A的浓度梯度下降放缓。 大概计算了一下Arg和Thr的乙腈洗脱浓度都处在10-11%之间,不知如何增加区间?
如同上述后者办法,18-30min之间出的峰分三组,可以分段洗脱,将18-22min的梯度减缓,如不变起始比例,延长时间,22-27min梯度可以不变,可以将原28min的梯度提高提早1min,总体下来时间也许并没延长。 尝试了19.5-21min之间缓慢洗脱(曲线9),乙腈浓度在10-11之间,依旧无法分来,差不多下班个峰连体,
两个分不开的氨基酸出峰时间处于20-22min,所以,延长第4和5步(即18-29min)的时间,也可以增加一个时间区域,把溶液A的浓度梯度下降放缓。
如同上述后者办法,18-30min之间出的峰分三组,可以分段洗脱,将18-22min的梯度减缓,如不变起始比例,延长时间,22-27min梯度可以不变,可以将原28min的梯度提高提早1min,总体下来时间也许并没延长。
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