荧光技术分为静态荧光技术和时间分辨荧光技术。静态荧光技术提供的结果是平均化的,无法捕捉到分子运动的动态信息。
在蛋白质或合成高分子研究中,静态荧光各向异性测定假设体系荧光各向异性衰减是单指数的,而实际上大多数大分子体系荧光各向异性衰减都是多指数衰减,这掩盖了实际体系的复杂性和荧光物种所处环境的差异性。
通过研究大分子体系荧光各向异性的实际衰减曲线可以得到有关大分子构象和链段柔性大小的信息。荧光强度衰减曲线也包含着十分有用的信息,特别是生物大分子和合成高分子在溶液中具有多种不同的构象。
时间分辨荧光各向异性研究能揭示供体和受体间的能量转移效率和受体在供体周围的分布形式。利用时间分辨荧光技术可以判断荧光猝灭是自由扩散控制还是特异性结合控制。
时间分辨荧光技术是获取分子间或分子内弱相互作用信息的重要工具,尤其是动态信息。
时间分辨荧光技术在表面活性剂类两性分子的组装、纳米材料的相互聚集、蛋白质或其他大分子在固液界面吸附过程中的构象调整、大分子与其他分子或金属离子的相互作用等领域有广泛应用。生物芯片技术利用荧光标记物与待测液中底物的特异性作用,实现对待测物的高效检测。