3-硝基苯甲酰乙酸乙酯是一种常用的有机合成和医药研发中间体，适用于实验室有机合成和化工医药合成过程中。它是一种有机酸衍生物，具有熔点为75℃的特性，可参与多种有机反应的合成过程。
2014年，刘建群等人首次利用基于迈克尔反应供体分子3-硝基苯甲酰乙酸乙酯的HPLC-DAD法快速发现了冬凌草中对映贝壳杉烯迈克尔反应受体分子的方法。他们通过将3-硝基苯甲酰乙酸乙酯与冬凌草提取液中的抗肿瘤对映贝壳杉烯二萜进行柱前衍生迈克尔加成反应，并在相同条件下对比分析反应液与原提取液的HPLC图谱，通过对映贝壳杉烯色谱峰面积的变化和产生的新色谱峰进行分析，确定了迈克尔反应受体分子的存在。这项研究为迈克尔反应受体分子活性成分的发现提供了一种新的方法。
具体的实验方法如下：
在没有碱性催化剂的条件下，迈克尔加成反应速度非常缓慢。因此，作者采用乙酸中和消除碱性催化剂乙醇钠来终止反应，并利用HPLC法监测反应物和产物的浓度变化，从而推断冬凌草甲素与3-硝基苯甲酰乙酸乙酯之间发生了迈克尔加成反应。
反应物溶液的配制方法如下：精确称取冬凌草甲素13.1mg、对硝基苯甲酰乙酸乙酯10.2mg、EtONa2.4mg，分别置于25mL容量瓶内，然后用无水乙醇稀释至刻度，得到各反应物的储备溶液。
制备迈克尔加成反应样品的步骤如下：取上述EtONa溶液1mL，加入10μL的冰醋酸完全中和催化剂，然后再分别加入冬凌草甲素1mL和3-硝基苯甲酰乙酸乙酯溶液1mL，摇匀后过0.45μm有机微孔滤膜，得到反应0min的样品，立即进行HPLC测定。另外，取对-硝基苯甲酰乙酸乙酯溶液1mL和EtONa溶液1mL混匀，放置5min，然后加入冬凌草甲素1mL，摇匀后在25℃条件下反应60min，之后加入10μL的冰醋酸终止反应，并通过0.45μm有机微孔滤膜得到反应60min的样品，立即进行HPLC测定。
[1] 刘建群, 高俊博, 舒积成, & 张锐. (2014). 冬凌草抗肿瘤对映贝壳杉烯迈克尔反应受体分子快速发现. 海峡药学(7).
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