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葡萄糖氧化酶的特点是什么? 1

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葡萄糖氧化酶(GOD)是一种蛋白质,分子量约160000道尔顿,由二个或四个多肽链构成。它在pH 5-7的条件下反应最适宜,在30-40℃的温度下催化反应。在催化过程中,葡萄糖首先脱氢形成葡萄糖酸内酯,使辅酶黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)还原为还原型FAD,然后葡萄糖酸内酯进一步水解为葡萄糖酸。还原型FAD与空气中的氧反应形成过氧化氢。

Glucose oxidase.png

葡萄糖氧化酶的性质

高纯度的葡萄糖氧化酶是淡黄色粉末,易溶于水,分子量约为150KD。它在377nm和455nm处有最大的光吸收波长。葡萄糖氧化酶的作用温度范围为30℃~60℃。固体酶制剂在0℃下可以稳定保存至少2年,在-15℃下可以稳定保存8年。葡萄糖氧化酶的稳定pH范围为4.0~8.0,具有良好的稳定性。一般来说,底物浓度对酶反应的影响不大。葡萄糖浓度在5%~20%之间,反应速度几乎不变。

葡萄糖氧化酶的作用机理

葡萄糖氧化酶作为一种新型的绿色添加剂,具有独特的作用方式。它不是通过改善营养素的消化利用和减轻抗营养因子的方式来改善动物生产性能。它可能通过与饲料中的葡萄糖作用产生葡萄糖酸来发挥作用,同时消耗氧气,使消化道更容易形成厌氧环境,促进有益的厌氧菌增殖。综合起来,葡萄糖氧化酶在肠道中的作用可能具有酸化剂和益生菌的作用。

葡萄糖氧化酶的生产方法

一种葡萄糖氧化酶的生产方法包括以下步骤:

(1)取黑曲霉菌种按10~15%的接种量接种于一级种子培养基中,在28~32℃培养20~24h,控制溶氧在50%以上,培养即得一级种子液;

(2)将一级种子液按10~15%的接种量接种于二级种子培养基中,在28~32℃培养20~24h,控制溶氧在50%以上,培养即得二级种子液;

(3)将二级种子液按10~15%的接种量接种于发酵培养基中,在28~32℃培养40~45h,控制溶氧在50%以上,得到混合培养基。然后按每升混合培养基添加8~10g果糖的比例添加果糖,并开始按每升混合培养基流加葡萄糖1~2g/小时的比例添加葡萄糖,同时控制pH为5.5~6.5,培养80~96h后即得酶活达到200U/mL以上的葡萄糖氧化酶发酵液。发酵培养基的成分包括葡萄糖、酵母浸膏、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化锰和碳酸钙。

(4)将葡萄糖氧化酶发酵液进行过滤,除去菌体及其他微小颗粒,然后对滤液进行超滤浓缩,直至得到酶活达到800U/mL以上的葡萄糖氧化酶酶液。

(5)将葡萄糖氧化酶酶液以淀粉为载体,进行喷雾干燥,即可得到酶活达到2500U/mL以上的固体葡萄糖氧化酶。

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