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如何测定药物中梓醇的含量? 1

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准确检测相关药物中梓醇的含量对于质量控制和药物疗效评估至关重要。


简述:地黄块根、叶中以环烯醚萜类含量较高,其中梓醇的含量尤为丰富,梓醇是地黄的主要药理与活性成分,亦是地黄物质基础研究的重点。现代药理研究发现地黄及有效成分梓醇均具有抗氧化、抗炎、免疫调节、改善贫血、缓解疲劳、抗肿瘤突变、降低血糖、降低血脂、增强记忆力、抗细胞凋亡等药理作用。


含量测定:

1.加味四妙勇安汤中

李慧红建立反相高效液相色谱法测定加味四妙勇安汤浸膏中绿原酸和梓醇含量的方法。方法:色谱柱为Merck Purospher?STARLP RP-18 endcapped柱(250 mm×4.6 mm 5μm)流速为1.0 mL/min柱温为35℃。(1)绿原酸的色谱条件,流动相为乙腈-0.4%磷酸(V∶V=11∶89)检测波长为327 nm。(2)梓醇的色谱条件,流动相A为乙腈,流动相B为0.1%磷酸,梯度洗脱(0~15 min 0.8%A;15~60 min 2%A)检测波长为210 nm。


得到绿原酸在4.420~442.0μg/mL(r=0.999 8)范围内质量浓度与峰面积成良好线性关系;平均回收率为99.38%(RSD=1.26%)。梓醇在9.760~488.0μg/mL(r=0.999 9)范围内质量浓度与峰面积成良好线性关系,平均回收率为99.34%(RSD=1.43%)。绿原酸和梓醇的最低检测限分别为0.40和0.82 ng定量限分别为1.20和2.44 ng精密度RSD分别为0.71%(n=6)和0.45%(n=6)。


2.天麻醒脑胶囊中

李翔等人建立天麻醒脑胶囊中天麻素、对羟基苯甲醇、毛蕊花糖苷、松果菊苷、梓醇、异毛蕊花糖苷、远志口山酮Ⅲ、36’-二芥子酰基蔗糖8种成分的含量测定方法为天麻醒脑胶囊的内在质量控制提供实验参考。方法:采用HPLC波长切换法同时测定制剂中天麻素、对羟基苯甲醇、毛蕊花糖苷、松果菊苷、梓醇、异毛蕊花糖苷、远志口山酮Ⅲ、36’-二芥子酰基蔗糖8种化学成分的含量色谱柱为Thermo BDS-C18柱(250 mm×4.6 mm5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱;柱温为35℃;检测波长分别为λ1=220 nm、λ2=330 nm。


得到天麻素、对羟基苯甲醇、毛蕊花糖苷、松果菊苷、梓醇、异毛蕊花糖苷、远志口山酮Ⅲ、36’-二芥子酰基蔗糖分离度良好;分别在2.340~46.80μg/mL(r=0.9999)、3.599~71.97μg/mL(r=0.9998)、2.091~41.81μg/mL(r=0.9998)、2.054~41.08μg/mL(r=0.9997)、2.764~55.27μg/mL(r=0.9999)、2.597~51.94μg/mL(r=0.9999)、2.789~55.78μg/mL(r=0.9998)、2.990~59.80μg/mL(r=0.9999)的范围内线性关系良好;平均回收率分别为99.82%(RSD=1.10%n=9)、100.79%(RSD=1.20%n=9)、100.07%(RSD=0.43%n=9)、101.22%(RSD=1.23%n=9)、100.99%(RSD=1.31%n=9)、98.98%(RSD=1.51%n=9)、98.79%(RSD=1.02%n=9)、97.83%(RSD=1.23%n=9)。


3.益精丸中

孙莹莹建立测定益精丸中梓醇和阿魏酸含量的HPLC方法。方法色谱条件:色谱柱:Atlantis T3 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm5μm);混合流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸(B)梯度洗脱;流速:0.8 ml/min;检测波长:210 nm;柱温:32℃。


得到梓醇和阿魏酸分别在6.24~124.80μg/ml(r=0.999 7n=6)4.96~99.20μg/ml(r=1.000 0n=6)范围内线性关系良好平均回收率分别为95.2%、95.3%RSD分别为1.3%和1.8%。


4.清凉膏药中

吴丽莎等人建立高效液相色谱波长切换法测定清凉膏药中氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、马替诺皂苷的含量。方法采用Dikma Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6 mm5μm)柱温25℃;采用甲醇-乙腈(3∶1)与0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱流速0.9 mL·min-1;氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素的检测波长为310 nm梓醇的检测波长为210 nm毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、马替诺皂苷的检测波长为330 nm。


得到氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素、梓醇、毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、马替诺皂苷的线性范围分别为2.17~43.40 mg·L-1(r=0.9991)1.76~35.20 mg·L-1(r=0.9998)0.88~17.60 mg·L-1(r=0.9993)3.26~65.20mg·L-1(r=0.9996)2.37~47.40 mg·L-1(r=0.9999)1.19~23.80 mg·L-1(r=0.9995)1.46~29.20 mg·L-1(r=0.9994);平均加样回收率分别为98.3%(RSD=1.4%)、97.6%(RSD=1.1%)、97.0%(RSD=1.5%)、100.0%(RSD=0.69%)、99.2%(RSD=0.99%)、97.4%(RSD=1.0%)、98.4%(RSD=0.89%)。


5.中风合剂中

江建丽等建立了同时测定中风合剂中梓醇、哈巴苷、绿原酸和芍药苷4种有效成分含量的高效液相色谱多波长法。方法:色谱柱为Welch XB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为0.06%磷酸溶液、B为乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长分别为200,231,327 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。


得到梓醇、哈巴苷、绿原酸、芍药苷进样量分别在0.156~1.248μg,0.154~1.232μg,0.136~1.086μg,0.231~1.845μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9,0.999 9,1.000 0,0.999 9),平均加样回收率分别为99.47%,99.54%,99.89%,99.94%,RSD分别为0.54%,0.91%,0.23%,0.35%(n=6)。


参考文献:

[1]李慧红,李敏,关红亚等. 反相高效液相色谱法测定加味四妙勇安汤中绿原酸和梓醇的含量 [J]. 中国医院用药评价与分析, 2023, 23 (01): 36-39+44. DOI:10.14009/j.issn.1672-2124.2023.01.007.

[2]李翔,代泓怡. HPLC波长切换法同时测定天麻醒脑胶囊中8种成分的含量 [J]. 中医药导报, 2020, 26 (11): 50-53+73. DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2020.11.011.

[3]孙响波,张雪敬,王嵩等. 黑地黄丸中梓醇HPLC定量研究 [J]. 辽宁中医药大学学报, 2020, 22 (07): 56-59. DOI:10.13194/j.issn.1673-842x.2020.07.013.

[4]孙莹莹. HPLC同时测定益精丸中梓醇和阿魏酸的含量 [J]. 中国处方药, 2020, 18 (03): 36-37.

[5]吴丽莎,朱新华,黄春兰等. 高效液相色谱波长切换法同时测定清凉膏药中7种成分的含量 [J]. 中南药学, 2019, 17 (12): 2135-2139.

[6]江建丽. 高效液相色谱多波长法同时测定中风合剂中梓醇、哈巴苷、绿原酸和芍药苷含量 [J]. 中国药业, 2019, 28 (15): 23-25.

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