骨髓中存在着造血基质细胞，但脐血中是否也存在这些细胞以及能否在体外扩增，目前相关研究报道较少。之前的研究成功分离培养了人脐血源黏附细胞，但发现分离培养过程困难。采用3%明胶联合Ficoll分离MNC的方法，发现细胞的贴壁率和原代培养的成功率都非常低。因此，需要在前期研究的基础上，探索不同明胶浓度和淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响，以寻找一种适合的分离培养条件，为人脐血源黏附细胞在临床上的应用奠定基础。
目前常用的细胞分离液有Percoll和Ficol1，它们利用细胞密度的差异将血细胞分离在不同的液体层次中。Percoll由表面黏附有聚乙烯吡咯酮的胶体硅组成，而Ficol1主要由葡聚糖和泛影酸钠组成。如果需要分离的标本量较少，使用细胞分离液可以形成较好的MNC层，并且方便收集。但如果需要分离的标本量较多，不仅分离液使用量大，而且离心后部分红细胞可能仍悬浮在分离液中，导致收集的MNC可能夹杂红细胞。此外，过大的界面也不利于MNC的收集。明胶溶液可以破坏红细胞表面电荷，加速红细胞沉降，使其与其他细胞分离。虽然3%明胶沉降红细胞的效果最好，但分离后除了MNC外，还含有其他有核细胞。对于仅需要MNC的研究，使用该液分离并不能达到预期效果。另外，明胶溶液是否能够去除脐血中的幼稚红细胞，还需要进一步的实验研究来证实。因此，目前大多数实验和临床应用中采用明胶联合分离液进行血细胞MNC的分离。
细胞分离液可以用于纯化大鼠胰岛。有研究建立了一种简便、易行和高效的胰岛分离纯化方法，以减少对胰岛细胞的损伤，获得高质量的胰岛组织。该方法选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液，分离消化胰腺组织，然后用淋巴细胞分离液纯化胰岛细胞。实验结果显示，可以获得大量高纯度的胰岛，纯度达到95%以上。体外葡萄糖刺激实验表明胰岛对刺激反应良好，将胰岛移植到糖尿病小鼠体内可以短期纠正其高血糖状态。因此，这种使用单一密度淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的方法是一种操作简单、价格低廉、重复性好的大鼠胰岛纯化方法。
此外，细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果也有影响。有研究探讨了在使用单克隆抗体SPA红细胞花环法(McAb-A-E法)检验T淋巴细胞亚群时，细胞分离液对阳性花环细胞计数结果以及非T淋巴细胞阳性花环计数结果的影响。实验选择了用细胞分离液法分离的单个核细胞(PBMC)和不加任何物质的抗凝血用自然沉降法分离的混合细胞，并用10倍量稀释液洗涤1次。然后，使用McAb-A-E直接法进行样本对照，并进行统计学处理。
实验结果对比了20例临床标本使用两种不同方法制取单个核细胞悬液的情况。比较了CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+等4组结果，发现CD3+、CD4+和CD8+的结果差异具有统计学意义，均为P<0.001。而CD4+/CD8+的结果比较，差异则没有统计学意义(P>0.05)。此外，两组非T淋巴细胞阳性花环的比较结果也具有统计学意义(P<0.001)。研究结论表明，使用细胞分离液分离的PBMC细胞，在用10倍量的稀释液洗涤1次后，细胞表面黏附的细胞分离液无法完全去除，这会使得阳性花环淋巴细胞计数结果偏高，而阴性淋巴细胞计数结果偏低。
[1] 不同明胶浓度及淋巴细胞分离液对人脐血源黏附细胞原代培养的影响
[2] 应用淋巴细胞分离液纯化大鼠胰岛的实验研究
[2] 淋巴细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果影响的研究
1
