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盐酸莫西沙星5min出峰,求赐教?

按照欧洲药典8.0检测盐酸莫西沙星,流动相:28体积的甲醇和72体积的缓冲盐(含0.5g四丁基硫酸氢胺和1g的磷酸二氢钾和3.4g的磷酸至1L烧杯中,加水500ml溶解后加入3.4g磷酸,定容至1L)。
稀释剂:含0.5g四丁基硫酸氢胺和1g的磷酸二氢钾和3.4g的磷酸至1L烧杯中,加水500ml溶解后,加入2ml磷酸,0.05g无水亚硫酸钠,定容至1L。
样品浓度0.1mg/ml。进样体积10μL。柱温45℃。流速1.3ml/min。
均与药典方法一致,色谱柱:Eclipse XDB-Phenyl 5μ*4.6*250mm,规格也与药典相同,可是药典盐酸莫西沙星出峰约14min,自己做的确是5min,也过夜平衡了。
有没有做过的朋友们,出来指教下,求高人指教啊?
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共13个回答
分别取的,然后在流动相瓶中摇匀后,超声的,是不是有什么问题呢?...
都是5分钟出峰??我之前没混匀,出峰时间有偏差。。

在确定样品没有出错的前提下,可以考虑
1、适当降低一下柱温;
2、适当减少有机相比例;
3、适当调整磷酸用量;
4、适当降低流速。
可以延长保留时间。
最小单项的百分之三十,总体改变的百分之十。

在确定样品没有出错的前提下,可以考虑
1、适当降低一下柱温;
2、适当减少有机相比例;
3、适当调整磷酸用量;
4、适当降低流速。
可以延长保留时间。
感谢您的回复,只是比较纠结的是同样的方法,为何和药典出峰时间差距这么大,这种现象正常吗?还是哪里出问题了?
以前做过这个项目  这个峰是杂质峰  不是分析的问题  是原料药的问题
你标准品也是这个时间出峰的前提下,这个出峰时间和你系统关系很大,你可以在流动相比列上调整整体百分之十左右,这个药典规定是可以的。
请问下,调整百分之十怎么调?一相增加百分之十,一项减少百分之十吗?
感谢您的回复,只是比较纠结的是同样的方法,为何和药典出峰时间差距这么大,这种现象正常吗?还是哪里出问题了?...
考虑一下,pH影响因素。流动性配制过程,或者使用的试剂,是否造成pH的偏差。
以前做过这个项目  这个峰是杂质峰  不是分析的问题  是原料药的问题
你们当时有关怎么检的

你标准品也是这个时间出峰的前提下,这个出峰时间和你系统关系很大,你可以在流动相比列上调整整体百分之十左右,这个药典规定是可以的。

流动相的配制方法中,甲醇与缓冲液是分别量取的,还是在同一个量筒中量取的并混合的?
分别取的,然后在流动相瓶中摇匀后,超声的,是不是有什么问题呢?
感谢您的回复,只是比较纠结的是同样的方法,为何和药典出峰时间差距这么大,这种现象正常吗?还是哪里出问题了?...
色谱柱厂家是一样的吗?厂家不同有这个可能。如果同品牌不同批的柱子差异不应该这么大。
流动相的配制方法中,甲醇与缓冲液是分别量取的,还是在同一个量筒中量取的并混合的?
流动性比例稍微调整下就好(减小有机相的比例),另外延长保留时间方法还有很多,增加具有一定分离能力的预柱(例如C18预柱),增加色谱柱的长度(30cm),选用粒径更加小粒径填料的色谱柱,有时候就是不知道人家是怎么样做的,不必这么较真,只要看情况略微调整下就好
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