本文将介绍三磷酸胞苷二钠中有机溶剂残留量的检测方法，以期为分析化学和药物管理等领域的相关研究人员提供实验支持。
简述：三磷酸胞苷二钠是核苷酸衍生物，在体内参与磷脂类合成代谢。能够穿过血－脑脊液屏障，它是脑磷脂合成与核酸代谢的中间产物和能量来源，也能提高神经细胞膜性结构的稳定性和重建能力、支持神经细胞存 活、延缓细胞衰老死亡、提高神经细胞抗损伤能力、促进神经突起生长。本品可以有效地防止神经细胞损伤或缺血后的继发死亡，还可以稳定肝细胞膜，促进肝细胞损伤后修复，对于血管硬化引起的心肌和脑组织有营养、促进再生和修复作用。在临床具有疗效确切、效果显著和不可替代性。在临床抢救病人时发挥着重要作用。
1. 合成：
1.1 酵母发酵
1.1.1 培养基
(1)种子培养基成分为:葡萄糖2%，蛋白胨2%，酵母粉1%。(斜面培养基另外加入 1%琼脂)。
(2)发酵培养基成分为:葡萄糖10%，蛋白胨1%，酵母粉1%，磷酸二钾 0.4%，磷酸氢二钾 0.2%，七水硫酸镁 0.02%。
1.1.2 种子培养
种子斜面培养9天后，用无菌水制成悬浮液，接种于种子培养基中培养，然后进行二级种子扩大培养。
1.1.3 发酵过程
向发酵罐中投入培养液。灭菌后调节pH值约4-6。将上述二级种子液接入发酵罐中，搅拌下培养。培养过程中流加葡萄糖和酵母粉。
1.2 制备粗酶液
发酵结束后调节 pH值，使酵母落泡沉淀，离心发酵液，收集上清液
1.3 酶促转化
溶解主料胞苷酸，加入磷酸二氢钾、氯化镁和葡萄糖，搅拌下再加入酶液反应缸保温 30-32℃使胞苷酸进行酶促转化，反应完毕后调pH5.0终止转化反应。加入硅藻土，搅拌，以去掉蛋白质。然后将转化液，离心得离心上清液。
在离心上清液中加入阳离子交换树脂搅拌吸附，调pH为1.2-4.0，静置，过滤，得滤液。滤液中加入乙醇，至含醇量达60%以上，静置。再过滤，收取滤饼。
1.4 离子交换层析
将上工序滤饼加水溶解稀释，过滤，得滤液。滤液调pH为2.0-2.5后，上树脂分离柱，进行吸附。检测从分离柱下口流出的溶液，吸附饱和时停止进样，用梯度氯化钠溶液进行洗脱。
1.5 纯化
为进一步纯化三磷酸胞苷二钠，在洗脱下来的三磷酸胞苷二钠溶液中加入药用活性炭，搅拌脱色，过滤。
1.6 精制
向三磷酸胞苷二钠液中按1:2-20比例加入药用酒精，收集沉淀。抽滤除去水分。真空干燥得到产物。
2. 分析
三磷酸胞苷二钠在制备过程中可能残留乙醇、丙酮、氯甲醚、甲苯、苯乙烯等有机溶剂，按照国家对新药管理的要求，对药品中有机溶剂残留量应建立有效的检测方法以进行监控。
杨丽莉等人建立了同时测定三磷酸胞苷二钠中乙醇、丙酮、氯甲醚、甲苯、苯乙烯5种有机溶剂残留量的毛细管气相色谱法。样品以乙腈为溶剂，经DB-FFAP(30 m×0.32 mm×0.25μm)毛细管柱分离，氢火焰离子化检测器检测，这5种有机溶剂呈良好的线性响应，平均回收率在98.3%-99.5%，精密度RSD在0.21%1.92%，最低检出限可达5.07.5 mg/kg。该方法简单、灵敏、准确，完全能满足药品中所述有机溶剂残留量的测定要求。
参考文献：
[1]张洪志, 工程酶固定化技术生产三磷酸胞苷二钠. 广西壮族自治区, 广西浦北制药厂, 2017-08-08.
[2]杨丽莉,赵陆华. 毛细管气相色谱法同时测定三磷酸胞苷二钠中5种有机溶剂残留量 [J]. 化学试剂, 2006, (09): 549-550. DOI:10.13822/j.cnki.hxsj.2006.09.014.
[3]北京双鹭药业股份有限公司. 一种三磷酸胞苷二钠的制备方法及应用. 2007-10-24.
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