羟基甲硝唑是甲硝唑的代谢物，而甲硝唑是一种硝基咪唑类药物。在农业生产中，甲硝唑常被用作驱除动物体内寄生虫的药物，但它会导致鸡蛋中残留甲硝唑。由于甲硝唑对人体有多种毒副作用，尤其是具有潜在的致癌性和致遗传性变异作用，因此有必要对鸡蛋中甲硝唑及其代谢产物的残留进行检验。
目前，测定甲硝唑及其代谢物含量的方法主要采用液相色谱法或液相色谱串联质谱法。然而，现行的标准方法中样品预处理过程繁琐，成本较高，需要使用固相萃取法或GPC法进行样品处理，或者采用内标法进行定量。
方法1：鸡蛋中甲硝唑及其代谢物残留量的测定方法：
（1）提取：取5g鸡蛋放入离心管中，加入10mL乙腈和5g无水硫酸钠，涡旋混匀后离心。取上层溶液，加入10mL正己烷，再次涡旋离心，取下层溶液待净化。
（2）净化：取上述溶液5mL，加载到PRIMEHLB固相萃取柱（200mg，6cc），以一秒一滴的速度进行流动，收集全部流出液。
（3）浓缩：将4.0mL流出液用氮气吹干，加入1.0mL0.1%甲酸水-甲醇（体积比50：50）溶解残渣，通过0.2μm微孔滤膜过滤，然后进行LCMSMS测试。
（4）测定：采用液相色谱法进行检测，使用AcqμityBEHC色谱柱（2.1mm*5mm，1.7μm），柱温为35℃，进样量为1μl，流动相为0.1%甲酸水和乙腈的梯度洗脱。
（5）测量结果：通过以上步骤测得鸡蛋中甲硝唑及羟基甲硝唑的含量低于0.5μg/kg。
方法2：蜂王浆中硝基咪唑类药物残留量的测定方法，尤其是涉及到羟基甲硝唑、2-甲硝咪唑、羟基二甲硝咪唑、甲硝唑、二甲硝咪唑、洛硝哒唑、氯甲硝咪唑、苯硝咪唑、羟基异丙硝唑和异丙硝唑等多种硝基咪唑类药物残留量的测定。
该方法采用甲醇沉淀蛋白，提取后使用HLB固相萃取小柱和C18固相萃取小柱进行净化，最后使用色谱-质谱/质谱仪进行测定。该方法具有专属性强、灵敏度高、结果准确的特点，不仅可以测定硝基咪唑原药，还可以测定一些代谢产物。该方法的测定低限为10μg/kg，满足国内外对蜂王浆中硝基咪唑类药物残留量的要求。回收率范围为70.7%~105.0%，相对标准偏差小于12.7%。
[1] CN201811088112.1鸡蛋中甲硝唑及其代谢物残留量的测定方法
[2] CN200910099612.X同时测定蜂王浆中多种硝基咪唑类药物残留量的检测方法
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