根据付玉杰等的研究，在异甘草素的提取工艺中，酸水解法和超临界CO2萃取法展示了其高效性，而大孔吸附树脂分离纯化异甘草素的工艺条件也得到了明确，为异甘草素的应用提供了有力的支持。
简介：异甘草素是甘草黄酮中的一种查尔酮?且为甘草黄酮中活性最高、市场价格最昂贵的成分。研究表明异甘草素有较强的药理活性?不仅有抗溃疡作用。而且有显著的抑制单胺氧化酶从而可治疗抑郁性精神病。同时异甘草素有益于糖尿病的治疗，还能解除乙酰胆碱、氯化钡、组织胺所致的肠痉挛。日本学者研究发现异甘草素对艾滋病病毒(HIV)增殖有抑制作用，其作用是甘草甜素的25倍。近年来国外一些学者的研究结果表明，异甘草素对肿瘤有明显的抑制作用，能抑制肺癌、乳腺癌、前列腺癌、大肠癌等多种肿瘤细胞增殖，多通过阻滞细胞周期诱导细胞凋亡发挥作用。基于异甘草素的多个优点，其提取分离工艺和临床研究日益受到国内外学者的重视。
提取：
1.酸水解法提取甘草中异甘草素工艺研究
苷键易被稀酸催化水解，反应一般在水或稀醇中进行，所用的酸有盐酸、硫酸、醋酸、甲酸等。苷发生酸水解反应的机理是: 苷键原子首先发生质子化，然后苷键断裂生成苷元和糖的阳碳离子中间体，在水中阳离子经溶剂化，在脱去离子而形成糖分子。
反应方程式：
提取流程图：
其中水解温度影响最大，其次为水解时间和液固比，而影响较小的因素为盐酸的浓度。
2. 超临界CO2萃取甘草素的提取工艺
超临界CO2萃取法一与常规溶剂提取方法相比，具有提取温度低、提取率高、溶剂用量少且无三废等优点，在提取过程中无溶剂残留，可以进行高选择性提取，缩短生产周期，并且在萃取过程中提取完全，能充分利用中药资源。实验方法如下：
2.1 标准曲线的建立
精密称取异甘草素对照品10mg置于10ml容量瓶中，用无水甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成1.0×10-3g/mL异甘草素对照储备液，分别精密移取储备液20、40、80、160和320μL，置于1mLDoff管中，用无水甲醇定容，进行HPLC分析。以峰面积Y对对照品浓度X绘制标准曲线。
2.2异甘草素超临界CO2萃取
按投料量5kg/罐准备甘草饮片并粉碎为粒径不大于0.25mm粉末，60 ℃烘干6h。用少量乙醇浸泡过夜后，装入萃取釜中，在夹带剂罐堆中加人液固比为V（乙醇）：m(甘草饮片)=5(ml):1(g) 的乙醇溶液。调节一定的温度、压力、CO2流速，向泵中充填CO2后，开动超临界设备，逐步将夹带剂泵入萃取罐中，每0.5h在分离釜出口收集萃取液，提取时间为4h。HPLC测定样品中异甘草素的浓度，然后按下式计算异甘草素的提取率。
式中，c为样品所测物质的质量浓度(10-3g/mL),V为样品体积(ml)，m为甘草原料干燥质量(g)。
3. 大孔吸附树脂分离纯化异甘草素研究
随着吸附层析法在天然药物提取中的广泛应用,大孔吸附树脂也被应用于分离纯化工艺。鉴于其成本低,效率高,可再生重复使用,耗费溶剂量少等特点,已有许多研究人员通过大孔吸附树脂对甘草超临界CO2萃取液中异甘草素进行吸附分离。已有研究证明AB-8树脂对异甘草素的吸附量大,脱附容易,可以应用于异甘草素的分离纯化。AB-8树脂分离纯化异甘草素的最佳工艺条件为：吸附:pH=5,室温,流速1.5BV/h,溶液处理量为5BV; 解吸附:洗脱剂为70%的乙醇溶液,流速1BV/h,用量4.5BV洗脱异甘草素。
参考文献：
[1]. 付玉杰等, 超临界CO2萃取异甘草素的提取工艺. 应用化学, 2007(01): 第67-70页.
[2]. 付玉杰等, 大孔吸附树脂分离纯化异甘草素的研究. 离子交换与吸附, 2006(04): 第315-322页.
[3]. 刘晓娜, 异甘草素的高效提取及分离纯化工艺研究, 2006, 东北林业大学.
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