本文将讲述如何测定卡维地洛片中的杂质4-环氧丙烷氧基咔唑，旨在为卡维地洛有关物质的检测和质量控制提供参考思路。
背景：4-环氧丙烷氧基咔唑，英文名称：4-Glycidyloxycarbazole，CAS：51997-51-4，分子式：C15H13NO2，外观与性状：淡黄色至近乎于白色粉末，密度：1.327g/cm3。4-环氧丙烷氧基咔唑是卡维地洛的合成中间体。
卡维地洛是一种α、β受体阻断剂，阻断受体的同时具有舒张血管的作用，用于治疗轻度及中度高血压和心力衰竭。卡维地洛的已知杂质有N－(2－羟基－3－(2－(甲氧基苯氧)－乙基)胺卡维地洛(杂质A)、卡维地洛双咔唑(杂质B)、N－甲基苯卡维地洛(杂质C)、4－环氧丙烷氧基咔唑(杂质D)、2－(2－甲氧基苯氧基)乙胺(杂质E)等。其中杂质D是中间体，杂质E是合成原料，并且能由卡维地洛的降解产生，其他杂质为工艺杂质，因此方法应控制降解杂质—杂质D、E。
测定卡维地洛片中的4-环氧丙烷氧基咔唑：
康铁纯等人建立反相高效液相色谱法(RP－HPLC)测定卡维地洛片有关物质。方法为:采用YMC－Pack Pro C8色谱柱(150 mm× 4.6 mm，5μm)，以乙腈－0.02 mol·L－1 磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH 2.0)为流动相进行梯度洗脱，流速1.0 mL·min－1 ，柱温 30℃，检测波长为220 nm(杂质E)和240 nm(其他杂质)。具体实验方法如下：
（1）色谱条件
采用YMC－Pack Pro C8色谱柱(150 mm×4.6 mm， 5μm)，以2.72 g·L－ 1 磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节 pH 2.0)为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱(0～ 5 min，20%B;5～20 min，20%B→60%B;20～30 min，60%B;30～30.1 min，60%B→20%B;30.1～35 min，20%B)，流速1.0 mL·min－1 ，柱温30℃，检测波长 220 nm(杂质E)和240 nm(其他杂质)，进样体积 10μL。
（2）溶液的制备
供试品溶液取本品细粉适量(约相当于卡维地洛25 mg)，置50 mL量瓶中，加稀释液［流动相A－流动相B(70∶30)］使卡维地洛溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。
对照品溶液取杂质D、E和卡维地洛的对照品各适量，精密称定，加稀释液溶解并稀释制成每1 mL 中各约含0.5μg的混合溶液，即得，色谱图见图2。
结果:卡维地洛与已知杂质及强制破坏实验产生的降解产物均能获得良好的分离，杂质D(4－环氧丙烷氧基咔唑)与杂质E［2－(2－甲氧基苯氧基)乙胺］质量浓度分别在0.063 98～ 12.80μg·mL－1 (r=0.999 9)和0.089 33～8.933μg·mL－1 (r=1.000)范围内与峰面积呈良好的线性关系。杂质D高、中、低浓度的回收率(n=3)分别为98.6%、96.5%、94.2%，RSD分别为1.1%、0.8%、1.4%;杂质E高、中、低浓度的回收率(n=3) 分别为99.2%、86%、92.7%，RSD分别为0.15%、0.65%、9.5%。杂质D和杂质E精密度试验的RSD(n=6)分别为1.4%和 0.31%，建立的方法与现行中国药典收载的方法相比能分离检测到更多的杂质。该方法经方法学验证，可用于卡维地洛有关物质的检测和质量控制。
参考文献：
[1]康铁纯,顾宵,何佳佳等.RP-HPLC测定卡维地洛片中的杂质D和杂质E[J].药物分析杂志,2015,35(10):1838-1842.DOI:10.16155/j.0254-1793.2015.10.26.
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