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雌三醇(E3)含量ELISA测试盒试剂使用须知: (1)请参照相关法规、文献、MSDS等信息,理解并掌握好试剂的特性,再进行安全操作。 (2)通常购买试剂时一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话,更加注意其他保管和管理。 (3)万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。对于使用后的废弃物,不要或者旧的试剂,应按照相关法律法规正当处理。 (4)购买后,请务必确认标签上的注意事项;做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制;在使用前再次确认标签上的注意事项,做好必要的安全对策;对没有标明其危害特性、有害特性的,也要慎重地进行操作;必须带好防护用具,小心翼翼进行操作。(5)实验过程中,务必保持实验室的通风良好,以减少试剂挥发可能带来的不良影响。同时,避免将ELISA测试盒暴露于直射阳光下或极端温湿度环境中,以防试剂性能受损。 (6)在进行样本处理和试剂混合时,使用专用的移液器和吸头,避免交叉污染。每次操作前后,都应使用酒精或其他适宜的消毒剂擦拭工作台和工具,确保操作环境的清洁度。 (7)对于试剂的稀释或配制,严格按照说明书中的比例和步骤进行,不得随意更改。稀释后的试剂应尽快使用,避免长时间存放导致的稳定性下降。 (8)在读取ELISA测试结果时,应使用专业的分光光度计或酶标仪,并按照仪器操作指南进行校准和测量,确保数据的准确性和可靠性。同时,记录好每次实验的条件和结果,以便后续的数据分析和问题追溯。 (9)若实验过程中发生意外情况,如试剂溅出、皮肤接触等,应立即停止操作,并根据实验室的应急预案采取相应措施。对于不确定如何处理的情况,应及时向专业人士求助。 (10)最后,为了不断提升实验效率和安全性,建议定期参加相关培训,更新自己的知识和技能。同时,保持对实验室安全的持续关注,不断优化实验流程和操作规范,确保每一次实验都能顺利进行。 ...
土壤脲酶(SUE)测试盒可见分光光度法样品处理 新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。处理后的土样需精确称取适量(如0.5g)置于已编号的离心管中,随后加入一定量的缓冲溶液(如pH 6.7的柠檬酸盐缓冲液),以模拟土壤中的自然环境并激活土壤脲酶活性。接着,向每个离心管中加入一定量的底物——尿素溶液,确保尿素浓度适中,以充分反映土壤脲酶的催化能力而不产生抑制效应。轻轻摇匀后,将离心管置于恒温培养箱中,在适宜的温度(如30℃)下培养一定时间(如24小时),让土壤脲酶充分作用于尿素,生成氨和二氧化碳。 培养结束后,取出离心管,为去除土壤颗粒及可能干扰后续测定的杂质,需进行离心处理,转速和时间需根据实验条件优化设定,通常可选择3000rpm离心10分钟。离心后,小心吸取上清液至新的试管中,准备进行氨的测定。 氨的测定采用纳氏试剂分光光度法,即向上清液中加入适量纳氏试剂,该试剂与氨反应生成淡黄至棕色的络合物,其颜色深浅与氨含量成正比。随后,将试管置于可见分光光度计中,在特定波长(如420nm)下测定吸光度值。通过预先绘制的标准曲线,可将测得的吸光度值转换为对应的氨含量,进而计算出土壤脲酶的活性。 此过程不仅要求实验操作精细,还需严格控制每一步的条件,以保证测试结果的准确性和可靠性。通过土壤脲酶活性的测定,我们可以了解土壤健康状况、评估土壤肥力及氮肥利用效率,为农业生产中的合理施肥提供科学依据。 测定操作: 1 、培养 测定管 对照管 风干土样(g) 0.25 0.25 试剂一(μL) 125 125 振荡混匀,室温放置 15min 试剂二(μL) 625 蒸馏水(μL) 625 试剂三(μL) 1250 1250 混匀,放入 37℃水浴培养 24h 后,10000g 25℃离心 10min,取上清液。 2、将培养结束的上清液稀释 10 倍(取 0.1mL 上清液,加入 0.9mL 蒸馏水)。 3、测氨量 测定管 对照管 稀释后的上清液(μL) 400 400 试剂四(μL) 80 80 试剂五(μL) 60 60 充分混匀,室温放置 20min 蒸馏水(μL) 460 460 混匀, 578nm 处蒸馏水调零,测 A 值,ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 ...
乙酰辅酶A羧化酶(ACC)测试盒微量法 测定操作: 1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 660nm,蒸馏水调零。 2、 酶促反应试剂的配制和预热:在试剂二瓶中加入 2.5mL 试剂一,充分溶解混匀;在试剂 三瓶中加入 2mL 蒸馏水,充分溶解混匀;将试剂一、二、三在 37℃(哺乳动物)或 25℃ (其它物种)预热 10 分钟。 3、定磷试剂的配制:按 H2O: 试剂四:试剂五:试剂六=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷试剂 应为浅黄色,若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。 注意:配试剂 用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。 4、0.5μmol/mL 标准磷应用液配制:将试剂七 20 倍稀释,即取 0.5mL 试剂七加 9.5 蒸馏水,充分混匀。 5、酶促反应 试剂名称(μL) 对照管 测定管 试剂一 90 试剂二 50 试剂三 40 样本 10 10 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)准确反应 30min 后,90℃水浴 5min(盖紧,以防止 水分散失),冷却后,10000g 25℃离心 5min,取上清 6、定磷 标准管 空白管 对照管 测定管 0.5μmol/mL 标准磷应用液 20 蒸馏水 20 上清液 20 20 定磷试剂 180 180 180 180 混匀,37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)保温 30min,冷却至室温,在 660nm 处,蒸 馏水调零,记录各管吸光值 A。标准管、空白管只要做一次即可,每个测定管需要设一个对 照管。 注意:若测定管吸光值大于 2,将样品用提取液稀释适当倍数后再进行测定,使吸光值小于 2,可提高检测灵敏度,计算公式中乘以相应稀释倍数。 计算公式: 1、按组织蛋白浓度计算: 定义:每小时每毫克组织蛋白产生 1μmol 无机磷的量为一个 ACC 活力单位。 ACC (μmol/h/mg prot)=(C 标准管×V 总)×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ (V 样×Cpr)÷T=10×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr 2、按样本鲜重计算: 定义:每小时每 g 组织产生 1μmol 无机磷的量为一个 ACC 活力单位。 ACC (μmol/h /g 鲜重)=(C 标准管×V 总)×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)×V 总÷ (W× V 样÷V 样总)÷T=10×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W 3、 按细菌或细胞密度计算: 定义:每小时每 500 万细菌或细胞产生 1μmol 无机磷的量为一个 ACC 活力单位。 ACC (U/104 cell)=(C 标准管×V 总)×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)×V 总÷ (500× V 样÷V 样总)÷T=0.02×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管) C 标准管:标准管浓度,0.5μmol/mL;V 总:酶促反应总体积,0.1mL;V 样:加入样本体 积,0.01mL ;V 样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,0.5 小时;Cpr:样本蛋白 质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;500:细菌或细胞总数,500 万。 ...
兔核因子κB抑制蛋白α(IκBα)酶联免疫试剂盒的洗涤过程,犹如一场精密的化学实验舞蹈,每一步都需精确无误。洗涤,这个看似简单的步骤,实则蕴含着对实验严谨态度的诠释。 洗涤过程开始于轻轻倾倒洗涤液,这液体宛如清澈的溪流,缓缓流入酶标板的孔洞中,带走了可能残留的非特异性结合物,确保检测结果的准确性。此时,洗涤液的流动声,犹如轻柔的乐章,在实验室中回荡,让人心生宁静。 接着,我们轻轻摇晃酶标板,让洗涤液与孔壁充分接触,将残留物彻底清除。这摇晃的过程,如同舞蹈家优雅的旋转,每一个动作都精准而有力。在摇晃的过程中,我们可以清晰地看到洗涤液在孔洞中翻滚,形成一个个小小的漩涡,仿佛是大自然中那神秘的漩涡,引人入胜。 洗涤完成后,我们需要用吸水纸或干净的纱布轻轻拍干酶标板,这个步骤同样需要细致入微。拍干的过程,如同画家在画布上轻轻拂去多余的颜料,让画面更加清晰。经过这一系列的洗涤和拍干步骤,酶标板变得干净清爽,仿佛焕然一新,为接下来的实验步骤做好了充分的准备。 兔核因子κB抑制蛋白α酶联免疫试剂盒的洗涤过程,虽然看似简单,但每一步都蕴含着对实验严谨态度的追求和对科学精神的敬畏。 ...
 
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