通过在荧光分光光度计上安装磷光配件，可以实现磷光测定。例如，将待测样品放置在装有液氮的石英杜瓦瓶中，即可进行低温磷光测定。
磷光发射光谱的测定方法如下：将待测样品置于细管中，除气并密封后，将其放入装有液氮的杜瓦瓶中。然后将试样和装有液氮的杜瓦瓶一起放入一个带有两个窗口的圆筒中，该圆筒可以旋转。照射光从一个窗口进入，激发试样产生荧光和磷光。此时，圆筒的另一面没有窗口，荧光和磷光被阻挡，无法进入检测器。当圆筒转过一个位置时，照射光被阻挡，导致荧光不再受到辐射。然而，由于磷光具有较长的寿命，它会继续辐射，并通过窗口到达检测器进行检测。详见图3-12。
在磷光测定中，常使用乙醚、异戊烷和乙醇混合溶剂（比例为5:15:12，简称为EPA）将样品溶解。该混合溶剂在液氮温度下不结晶，呈现透明玻璃状，并且不会散射照射光线，使得样品能够受到光的照射。
磷光分析主要用于测定有机化合物，例如石油产品、多环芳烃、农药和药物等。
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