最近，社交群里突然讨论起四氢呋喃（THF）是否适用于液相色谱。答案是肯定的，但与其他溶剂相比，需要注意的地方可能更多。
在开始讨论之前，让我们先简单介绍一下反相色谱中常用的溶剂。除了水，反相色谱中最常用的溶剂还包括乙腈、甲醇和四氢呋喃。没错，四氢呋喃也是常用试剂之一。
让我们先来看一下常用反相溶剂的吸收-波长曲线：
近年来，对药物杂质谱的研究要求越来越高，导致杂质谱通常含有许多组分。为了同时考虑不同组分，从紫外吸收的角度来看，乙腈成为我们最喜欢选择的溶剂之一。此外，乙腈相较于甲醇和四氢呋喃，具有更低的柱背压。甲醇由于价格低和毒性小的优势，仍然在一定程度上被使用。然而，由于使用问题，包括价格和毒性问题，四氢呋喃的使用逐渐减少。当然，不断进步的科技和更新的固定相也在推动这一趋势。尽管使用较少，尽管大家更喜欢一开始就使用乙腈，但甲醇和四氢呋喃独特的选择性决定了它们在某些情况下无法被乙腈替代。
首先，从上面的吸收波长曲线可以看出，尽管THF（212nm）的截止波长比MeOH（205nm）的截止波长多了7nm，但两者的吸收差别很明显，THF在较高波长下仍有吸收。因此，在选择THF作为部分添加成分时，需要关注方法的波长选择和灵敏度问题。
其次，由于四氢呋喃具有明显的化学不稳定性，容易氧化成过氧化物。溶剂的稳定性是首要考虑的因素，如果存在活性较大的过氧化物，很可能导致样品分析过程中被破坏，从而产生不真实的杂质谱，影响结果的判断。为了控制THF中过氧化物的含量，通常会添加化学稳定剂BHT（2,5-二叔丁基-4-甲基苯酚）。因此，我们购买的THF通常有两种，一种是添加了稳定剂BHT的，一种是没有添加BHT的。请在实际工作中注意试剂标签上的信息。BHT具有苯环结构，因此处理过的BHT很容易带入紫外可吸收的物质，对使用紫外检测器的测试结果产生影响。
最后，还有一点是四氢呋喃对硬件系统的影响。在谈论这一点之前，让我们先了解一下什么是peek材质。
通常所说的peek材质是指聚醚醚酮材料，其英文名称为polyetheretherketone（简称PEEK）。peek管和peek接头是我们日常工作中通用性很强的色谱配件。PEEK材质具有比不锈钢更灵活的性能和匹配度，价格也比钛合金更具优势。PEEK材质具有优异的化学稳定性和生物兼容性。由于其化学稳定性，我们可以在流动相中部分添加四氢呋喃成分。为什么说是部分添加呢？这是因为尽管PEEK材料具有优异的化学稳定性，但在高浓度的THF环境下仍会有微小的溶胀。这种溶胀可能不一定会影响方法的稳定性，但长期以往，系统中的PEEK管会变脆老化。因此，控制THF的比例并定期关注仪器的硬件性能是使用THF过程中的重要关注点。另外，也有说法称其对泵的密封垫有腐蚀作用。尽管小编认为聚四氟乙烯的密封垫不容易损坏，但关注仪器本身，正确使用和维护它也是非常重要的。优质的仪器和良好的系统性能能为我们提供更可靠的保障。
来源：药品质量研究微信公众号
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