伊红是一种酸性染料，由醌式苯环结构的发色基团和卤素原子溴及钠盐的助色基团组成。它是一种人工合成的化学试剂，外观呈砖红色或酱红色结晶体，具有绿黄色荧光。伊红共有4种类型，但伊红Y是与苏木精配对最理想的对比染料。它在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷结合，使细胞质染色，形成与细胞核鲜明对比的红色或粉红色。因此，伊红是常用的胞质染料之一。
HE染色效果受到多种因素的影响，包括组织的新鲜程度、固定是否及时以及脱水包埋过程是否恰当。染色液的配置和使用也是决定染色效果的重要环节之一。在长期的工作实践中发现，采用不同的伊红配置方法所得的染液，HE染色效果存在明显差异。
1）传统法：取伊红1g，加双蒸水100ml，用玻璃棒充分搅拌溶解后，静置过夜，过滤后待用，在使用前加入冰醋酸0.1ml。
2）改良法：取伊红1g，加入双蒸水100ml，用玻璃棒充分搅拌溶解后，加入浓盐酸2ml，充分搅拌，静置过夜，过滤，沉淀物用双蒸水冲洗2次，然后将沉淀物连同滤纸放入恒温干燥箱内充分干燥，滤液弃之不用。将已干燥的沉淀物置于烧杯中，加入95%乙200ml，搅拌溶解后待用，使用前用95%乙醇稀释1倍，即再加入95%乙醇200ml。
[1] 水溶性伊红Y不同配置法对HE染色效果的影响
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