本文将介绍测定4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸中氯磺酸残留量的方法，以期为分析化学和医药等领域的相关研究人员提供实验支持。
简述：4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸，英文名称：4-Chloro-5-sulphamoylbenzoic acid，CAS：1205-30-7，分子式：C7H6ClNO4S，外观与性状：白色粉末。4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸常用于药物布美他尼的合成。
测定4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸中氯磺酸残留量：
吲达帕胺是由法国 Servier 公司研制的长效抗高血压药，具有较强的血管扩张作用和一定的利尿效果。针对吲达帕胺作为常用抗高血压药的特性，对其原料药中潜在的基因毒性杂质进行全面研究具有重要的实际意义。吲达帕胺的最大日服用剂量（MDD）为10mg/天，因此根据TTC计算，原料药中基因毒性杂质的可接受浓度为150ppm。4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸是吲达帕胺生产工艺的关键起始物料，其中潜在的基因毒性杂质可能会带入吲达帕胺中。氯磺酸作为潜在的基因毒性杂质，根据法规要求，必须对其残留量进行检测和控制。即氯磺酸在最终 API中的含量报告值应低于由 TCC 推算出的接受标准 150ppm。
氯磺酸是一种强氧化剂，与水接触会剧烈分解，释放大量热量和浓烟。在潮湿空气中与金属接触时，会腐蚀金属并释放氢气，易于引发燃烧爆炸。当与易燃物（如苯）和可燃物（如糖、纤维素等）接触时，会发生剧烈反应，甚至引发燃烧，同时具有强腐蚀性。因此，一般的分析方法无法对其残留量进行有效检测。谢玲玲等人开发了离子色谱法对其进行监控，并为了保证实验的安全性和有效性，利用氯磺酸遇水即产生水解反应的特点（反应方程式：HSO3Cl + H2O = H2SO4 + HCl），采用无水硫酸钠替代氯磺酸配制对照溶液，即 1g 氯磺酸相当于 1.2g 硫酸钠。分析方法具体如下：
1. 色谱条件
检测器：ECD，流速：1.0ml/min，柱温：室温（25℃），进样量：20μl，运行时间：20min。
2. 溶液配制
2.1 淋洗液：称取碳酸氢钠 0.24g，碳酸钠 0.95g，加蒸馏水 2L 使溶解，用 0.45μm 的滤膜过滤。
2.2 再生液：取硫酸 2mL 加入到 2L 蒸馏水中，混匀，用 0.45μm 的滤膜过滤。
2.3 硫酸钠储备液：
（1）溶液①：称取无水硫酸钠 54mg 用蒸馏水稀释至 100.0mL。
（2）溶液②（即“硫酸钠储备液”）：取溶液①溶液 2.0mL，用蒸馏水稀释至 100.0mL。
2.4 对照溶液：取“硫酸钠储备液”5.0mL，用蒸馏水稀释至 50.0mL。
2.5 样品溶液：称取试样 400mg 加蒸馏水至 20.0mL，超声震荡 10min，用0.22μm 过滤膜过滤后使用。
2.6 专属性溶液：称取试样 400mg，加入“硫酸钠储备液”2.0mL，加蒸馏水至 20.0mL，超声震荡 10min，用 0.22μm 过滤膜过滤后使用。
2.7 精密度溶液：称取试样 400mg，加入“硫酸钠储备液”4.0mL，加蒸馏水至 20.0mL，超声震荡 10min，用 0.22μm 过滤膜过滤后使用。（将此溶液重复配制 6 份，作为精密度溶液①~⑥）
2.8 定量限（LOQ）溶液：取对照溶液逐步稀释。
2.9 检测线（LOD）溶液：取定量限（LOQ）溶液逐步稀释。
3. 结果
该方法适用于 4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸中氯磺酸残留的检测，检出限为11.22μg/ml，定量限为 44.88μg/ml。6 批样品的检测结果均小于 45ppm，根据EMA 发布的 EMA/CHMP/SWP/431994/2007《基因毒性杂质限度指南问答》，氯磺酸在 6 批 4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸中残留量都小于 45ppm（可接受浓度150ppm 的 30%），故氯磺酸无需在原料药吲达帕胺中进行考察。
参考文献：
[1] 谢玲玲,李贺然. 离子色谱法测定4-氯-3-磺酰胺基苯甲酸中氯磺酸残留量[J]. 中国化工贸易,2015,7(33):11-12. DOI:10.3969/j.issn.1674-5167.2015.33.009.
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