聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒采用硅基质材料和缓冲液系统，可以高效、专一地回收DNA片段，并去除杂质。回收的DNA可用于酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
在第一次使用前，在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇，并使用台式离心机在室温下进行离心。
1. 从聚丙烯酰胺凝胶中切下目的DNA条带（尽量切除多余部分），放入1.5ml离心管中，称取重量，用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入2倍体积的溶液A吹打混匀（每100mg胶加入200ul溶液A），进行75℃水浴30分钟。
2. 用1ml的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中（将胶一起吸入，溶液过多时可分次加入），进行13,000rpm离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管中。
3. 取6倍体积溶液B加入原离心管中（每100mg胶加入600ul），清洗管壁后加入过滤柱中（溶液过多时可分次加入），颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀，进行13,000rpm离心1分钟。将所有收集的滤出液混合。
4. 将总滤出液混匀后加入吸附柱中（溶液过多时可分次加入），进行13,000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中。
5. 向吸附柱中加入600ul漂洗液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），进行13,000rpm离心30-60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
6. 向吸附柱中加入600ul漂洗液，进行13,000rpm离心30-60秒，倒掉废液。
7. 将离心吸附柱放回收集管中，进行13,000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液。将吸附柱开盖置于室温1-2分钟，彻底晾干，以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8. 将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量65-70℃预热的洗脱缓冲液20-30ul，室温放置2分钟。进行13,000rpm离心2分钟收集DNA溶液。注意：为了增加回收效率，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，进行13,000rpm再次离心1分钟。洗脱缓冲液体积不应少于20ul，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
9. DNA回收产物可直接进行后续实验或者保存在-20℃。
1. 电泳时最好使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
2. 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。
3. 本试剂盒对<50bp DNA片段回收效率偏低（30%左右），如要回收，应加大结合液的体积，延长吸附和洗脱的时间。
4. 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。
[1] 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒使用说明书
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