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求助,蛋白条带跑散了...
生物医学工程
求助,蛋白条带跑散了怎么办?
实验新手,这个问题困扰了好久,感谢大家给予意见。
我跑电泳Marker 每次都没有问题,纯的蛋白跑出来也没有问题,条带清晰。用10%的胶,但是用表面活性剂和盐处理过得蛋白都会跑散,也没有条带出来。我的目标蛋白分子量是66K 的,但是PEG6000在水中的水化半径为25-35K ,有什么好的办法除去PEG吗?
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共3个回答
橘子是只喵~,~
2022-02-19回答
推荐一个好用的网站,英格恩生物技术博客,上面有很多实用的实验内容,可以去看看
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Emoton.,设备维修
2020-04-19回答
PEG可以溶于水也可以溶于乙醇,用无水乙醇900ul加100ul含PEG 的样品,发现有PEG析出,可能是溶解度没那么高吧。但是不知道此时蛋白有没有沉淀,那我是不是可以离心之后,再用无水乙醇去沉淀一次,把没融的PEG去除了。不知这样是否可行,因为不确定这样的话乙醇还能否起到沉淀蛋白的作用?
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柠萌薄咊,销售工程师
2020-04-19回答
用过TCA 沉淀法还有硫酸铵沉淀法都会分相,丙酮沉淀法PEG会析出,还有10K 超滤膜,还有14000的透析袋都透不过PEG 。试过很多方法了,实在没办法了,一直卡在着。各位老师有什么建议吗?
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