求各路大神指点 关于大肠杆菌，农杆菌摇菌问题？

最近实验室摇菌，菌株是转化到rosette里面的有目的片段的pet28（+）载体，抗性kan，正常工作浓度50，有时小摇能摇起来，扩大摇没有，多数情况是根本摇不起来，开始以为是菌直接摇菌的问题，在相同浓度的平板上划线，菌落长势良好，挑菌摇菌，依旧不长，菌液15h清澈。抗生素，培养基已经全部换过一遍，原菌种也试过，液体培养基中不长，固体培养基长势良好，实在找不到原因，跪求各路大神指点！！！！！！农杆菌也不长菌，情况同上。