牛血清白蛋白（BSA）是生化实验室中最常见且应用最广泛的蛋白质之一。尽管BSA可能不起眼，但在生化实验中扮演着关键角色。
BSA的前体蛋白全长为607个氨基酸。经过N端的18个信号肽和6个前肽的剪切，形成含有583个氨基酸、分子量约为66.5kDa的成熟BSA蛋白。
BSA在生化实验中有广泛的应用。它常被用于维持蛋白的稳定性，并在ELISA实验、western blot以及磁免疫检测中的固相封闭中发挥作用。
当蛋白质受到压力（如加热、紫外照射、氧化、剪切力等）时，蛋白质的空间折叠会发生变化，导致内部疏水位点暴露，从而失去生物活性。BSA具有良好的热稳定性，即使温度升至65度，其空间结构仍然可逆。此外，BSA能够与许多物质形成可逆结合，尤其是水溶性较差的物质，如脂肪酸、血红素、胆红素、带负电荷的芳香化合物等，从而增加它们的水溶性。因此，BSA是一种理想的蛋白保护剂。当酶或抗体等蛋白质发生空间结构变化时，BSA能够与其发生可逆结合，形成稳定的、可溶的高分子复合物，防止蛋白质发生无定形聚集。此外，溶液中的BSA能够与容器表面结合，防止蛋白质吸附在容器表面而浓度降低。
在免疫检测过程中，需要将抗体固定在固相表面上，如微孔板、磁颗粒、聚苯乙烯微球或硝酸纤维膜表面。由于蛋白质是一种粘性较大的分子，样本中的杂蛋白会与固相表面的疏水位点发生非特异性结合，造成背景干扰。因此，需要使用封闭剂封闭固相表面上的多余位点。常用的封闭剂有BSA、酪蛋白和明胶等，它们能够吸附在固相表面上，防止抗体或抗原与固相表面发生非特异性结合，从而降低检测本底，提高灵敏度。
BSA是一种球蛋白，分子量约为66.5kDa，表面含有大量的氨基和羧基残基。BSA的空间结构可以随着温度、pH和盐浓度的变化而改变，因此它是一种柔性分子。作为常见的封闭蛋白，BSA能够与亲水表面、疏水表面以及活化的共价结合表面（如活化羧基、氨基、环氧基、甲苯磺酰基等）结合，抑制非特异性吸附，是一种理想的固相封闭剂。
BSA表面含有大量的羧基和氨基，可以与表面的活化基团结合，封闭多余位点。最常见的应用是在化学发光免疫磁珠偶联抗体中。例如，通过活化羧基表面的磁珠，可以与抗体表面的氨基反应，使抗体共价结合在磁珠表面。这一过程需要封闭多余的活化羧基位点，而BSA的分子尺寸较小，可以进入表面抗体之间的间隙。此外，由于BSA表面含有大量的氨基，它可以与活化羧基反应，封闭多余的活性位点。同时，BSA表面还含有一定数量的氨基酸疏水残基，如丙氨酸和亮氨酸，也可以封闭表面的疏水位点。
值得注意的是，Larsericsdotter等人的研究发现，BSA在磷酸盐溶液中吸附在固相表面时更加紧密，形成的结构也更加稳定。这是因为磷酸盐能够与BSA上的甘氨酸和精氨酸结合，消除结构性静电排斥。因此，在磷酸缓冲液中，BSA在固相表面具有更高的结合效率。
除了作为蛋白稳定剂和固相封闭剂，BSA还可以作为小分子的载体。例如，可以将荧光分子修饰在BSA表面，然后将荧光-BSA与抗体偶联，以增加荧光强度，同时避免由于抗体过度修饰而导致抗体失活。
来源：生物医学知识局
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