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qPCR标准曲线?

广大的朋友,求回复

最近做qPCR试验,用的是探针法,探针是从赛默飞购买的,用生工合成的RNA作为标准品,逆转后进行稀释,稀释后作为模板进行qPCR,操作的步骤和试剂厂家没有进行更换,我前面的检测标曲的结果范围是10的7次方拷贝数-10的3次方拷贝数,10的7次方拷贝数CT值约为16-17,现在10的7次方的拷贝数约为23-24,且检测结果变成这样后我的检测结果很稳定一直这样,目前已排除标准品、试剂、人为操作以及仪器的问题,请问是哪里出了问题哇

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基线和阈值线有没有调?

模板降解?

原批次的试剂还有吗?原批次是否可以重现?

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