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使用VSVG克隆的质粒作为包膜蛋白能用来感染本来不能被感染的细胞吗?

我知道:VSVG是一种包膜蛋白(病毒正是通过包膜蛋白与宿主细胞识别,然后进入细胞),全称是疱疹性口腔炎病毒糖蛋白G,因为这个蛋白具有广泛的宿主范围,因此我们在改造病毒载体的时候经常用这种包膜蛋白代替原来病毒中宿主范围较小的包膜蛋白。

请问:

1、这个病毒怎么侵入宿主并且复制的啊?是破坏细胞膜结构吗?

2、VSVG质粒转染后,通过plat-e细胞产生的病毒感染细胞的种类,包括人类细胞吗?

3、感染了替换VSVG的蛋白后,我的细胞能更广泛被感染吗?

 

还想问一下,是不是就是说被这个VSVG病毒颗粒感染后的细胞是不是就会变成我说的广泛宿主细胞呢?我就可以用这个被VSVG感染的宿主细胞去感染很多原本不能感染的病毒了呢?打个比方,仙台病毒不能感染人细胞,那么被VSVG感染后的人细胞是不是就可以感染仙台病毒了呢?


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共2个回答
我们实验室构建的病毒载体,包括VSG-V(包装蛋白),pVpack-GP(整合蛋白),MMLV(目标蛋白)。三个质粒安装一定的浓度混合转染目标细胞,就可以了。
首先你清楚我们在做转染的时候,并不是将所有的病毒元件一次性转进去的,考虑到安全性,我们将将病毒的元件分为几个部分。举个例子:逆转录病毒主要包括三种核心蛋白,gag(核心蛋白基因),pol(复制、整合酶基因),env(表面抗原),通常将gag和pol整合到293中,env克隆到载体上作为包装质粒,目的基因插入到含有病毒的3‘LTR及5’LTR的载体中,这样转染以后在宿主细胞中三种蛋白同时表达组装成为一个完整的病毒。很多病毒的env的宿主范围很小,只能感染少数种类的细胞,而VSVG是一种宿主范围很广泛的env,之所以说它就有广泛的宿主范围是因为这种抗原可以在很多细胞表面都能找到对应的受体,从而病毒可以通过内吞作用进入细胞。而宿主细胞被感染后表面受体的种类不会并不会发生改变。就是你的细胞能被VSVG感染,但是还是不能感染仙台病毒。
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