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拟南芥水杨酸信号传导...
生物医学工程
拟南芥水杨酸信号传导正调控基因的实验方案?
大家好,我在学习过程中遇到一个关于用正向遗传研究拟南芥
水杨酸
信号传导正调控基因的问题,因为没有学过遗传学的东西,所以对这个实验的设计有困难,希望大家能够帮忙一下啊~
具体是:以拟南芥为模式植物,利用正向遗传法,克隆并鉴定新的水杨酸信号传导正调控基因的实验方案。
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共6个回答
青珂,给排水工程师
2019-01-02回答
正向遗传学很坑爹的,除非很有钱
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メSomnus丶せ,设备工程师
2019-01-02回答
1, 构建水杨酸刺激下上调基因的启动子融合荧光素酶的报告基因系统
2,转基因,获得阳性植株,通过几代的筛选,获得表达稳定的转基因植株。该植株在SA刺激下应该可以检测到相应基因的启动子活性升高。
3,通过诱变,获得突变群体,繁育种子,得到突变体库。
4,筛选突变体库中SA刺激下基因表达与野生型显著不同的植株。荧光素酶系统可以高通量筛选,且对拟南芥幼苗无损,筛选到的植株可以移栽至培养土并收获种子。在下一代需要进一步验证。
5,如果获得确切表型的突变体就可以着手克隆基因了。
6,通过图位克隆的方法可以获得导致表型改变的基因的位置,通过测序,可以确定突变的存在,并通过转基因模拟、分析相应基因突变体等手段,确定该基因与表型的直接关系。
7,对该基因进行深入研究。那就不是我说得清楚的了。
该策略仅供参考。
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风尘两清让步,给排水工程师
2019-01-02回答
如果用带抗生素基因的T-DNA转入到拟南芥中得到的效果是和加入荧光素酶启动子的效果是一样的吗?这样就可以用抗生素筛选出来了是吗?
因为基本上没有做过这些,所以问题比较多…*^_^*
...
我觉得二楼朋友的意思是用农杆菌把带有上调基因的启动子融合荧光素酶的质粒带进植物里,这样的系统同时可以携带抗生素或除草剂筛选标记
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超乖,设备维修
2019-01-02回答
我还有一个问题,就是这个后来筛突变体是要筛出没有荧光的突变体吗?意思就是说没有荧光也就是正调控因子被突变掉了?
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安逸稳定,设备工程师
2019-01-02回答
1,拟南芥通常用农杆菌介导的转化。
2,转基因后,阳性植株可以提供抗生素筛选获得。生长发育表现型与野生型一致。可以检测到荧光素酶活性。
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幻墨轻尘,设备工程师
2019-01-02回答
如果用带抗生素基因的T-DNA转入到拟南芥中得到的效果是和加入荧光素酶启动子的效果是一样的吗?这样就可以用抗生素筛选出来了是吗?
因为基本上没有做过这些,所以问题比较多…*^_^*
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