如何测定硫酸软骨素钠的含量？ ¹

在确定硫酸软骨素钠的含量的过程中，准确的测定方法至关重要。本文将探讨其测定技术，以确保对该化合物含量的准确评估。

简述：硫酸软骨素钠是从动物的喉骨、鼻中骨、气管等软骨组织提取制得的硫酸化链状粘多糖钠盐。硫酸软骨素钠主要由N-乙酰半乳糖胺(2-乙酰胺-2脱氧-β-D-吡喃半乳糖)和D-葡萄糖醛酸的共聚物的硫酸酯钠盐，共聚物内己糖通过β-1，3及β-1，4糖苷键交替连接。 目前硫酸软骨素钠采用的是碱盐消化沉淀法，即软骨经碱化后，酶解、过滤后用酒精直接沉淀。硫酸软骨素钠含量测定方法很多，分光光度法和电位滴定法在质量控制中应用比较广泛。

含量测定：

1. 酶解液相色谱法

（1）报道一

刘浩等人采用酶解液相色谱法测定硫酸软骨素钠含量，用强阴离子交换硅胶为填充剂(Hypersil SAX柱，250mm×4.6mm，5ul)以水(用稀盐酸调节pH值至3.5)为流动相A；以2mol/L氯化钠溶液(用稀盐酸调节pH值至3.5)为流动相B；流速为每分钟1.0ml；检测波长为232nm。梯度洗脱的HPLC法。酶解液相色谱法有着准确、灵敏度高，重现性好等优点。

（2）报道二

任丽萍等人建立酶解液相色谱法测定硫酸软骨素钠的含量。使用硫酸软骨素ABC酶酶解硫酸软骨素钠，使用强阴离子交换高效液相色谱测定酶解产生的二糖，通过计算二糖峰面积总和确定硫酸软骨素钠的含量。色谱柱为Zorbax SAX(250 mm×4.6 mm，5μm)；流动相为pH 3.5的水和pH 3.5的2 mol.L-1的氯化钠溶液，流速为1.0 mL.min-1，检测波长为232 nm，柱温为40℃。结果表现为，硫酸软骨素钠的线性范围为0.25～1.50 mg.mL-1，r=0.9999；精密度RSD为0.3%；回收率为101.2%，RSD为1.6%(n=5)；最低检测限为4.0μg.mL-1，定量限为11.9μg.mL-1。该方法具有专属性好，灵敏度高，重现性好的优点。

2. HPLC法

（1）报道一

赵鑫等人建立了HPLC法测定鹿骨片中硫酸软骨素钠的含量方法。采用C18柱(250×4.6mm，5μm)为色谱柱；甲醇-0.004%庚烷磺酸钠溶液(20:80)，用磷酸调节p H值至3.5为流动相；流速0.8m L·min-1；检测波长197nm。结果:该方法在0.0208mg·m L-10.2078mg·m L-1浓度范围内具有良好的线性关系，R=0.9999；平均回收率为99.80%，RSD(%)=0.35%。该测定方法准确、可靠、重复性好，可作为鹿骨片的质量控制方法。

（2）报道二

刘志辉等人建立测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中硫酸软骨素钠含量的方法。采用高效液相色谱法。色谱柱为JADE-PAK ODS-AQ，流动相为0.008 mol/L磷酸二氢铵溶液(p H=3.6)，流速为0.5 ml/min，检测波长为194 nm，柱温为30℃，进样量为10μl。硫酸软骨素钠检测质量浓度线性范围为562.5μg/ml(r=0.999 9)，平均回收率为99.12%(RSD=0.7%，n=9)，检测限为2.5 ng。该方法灵敏度高、专属性强、操作简单、结果准确，可为控制该药品的质量提供参考。

3. 光度滴定法

Liang Z M等人对光度滴定法定量原料及CosequinDS咀嚼片中的硫酸软骨素钠进行了方法验证与发展。光度滴定条件是:0.1%(w/v)氯化十六烷基吡啶为滴定剂，光度指示检测波长420nm。在0.6～1.4mg/mL浓度范围内，硫酸软骨素钠的标准曲线呈线性(r≥0.99)。将咀嚼片粉碎成细粉并用水提取后，经0.45μm膜滤器过滤。回收率97%～103%。光度滴定法具有良好的专属性、准确度、精密度且线性卓越，非常适用于定量检测原料及CosequinDS咀嚼片中的硫酸软骨素钠。2001年由ElsevierScienceB.V.公布。

参考文献：

[1]刘浩，于芳. 硫酸软骨素钠含量检测方法的对比研究 [J]. 黑龙江医药， 2017， 30 (05): 966-969. DOI:10.14035/j.cnki.hljyy.2017.05.007.

[2]冉崇荣， 硫酸软骨素钠的制备方法. 重庆市， 重庆奥力生物制药有限公司， 2015-09-23.

[3]赵鑫. HPLC法测定鹿骨片中硫酸软骨素钠的含量 [J]. 黑龙江科技信息， 2015， (05): 11.

[4]刘志辉. HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中硫酸软骨素钠的含量 [J]. 中国药房， 2014， 25 (37): 3520-3522.

[5]任丽萍，于海洲，宋玉娟等. 酶解液相色谱法测定硫酸软骨素钠含量 [J]. 药物分析杂志， 2012， 32 (07): 1246-1248+1258. DOI:10.16155/j.0254-1793.2012.07.038.

[6]M Z L . 光度滴定法定量Cosequin~ DS咀嚼片中硫酸软骨素钠的方法验证与发展 [J]. 食品与药品， 2009， 11 (09): 73-75.