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如何制备硫酸软骨素钠? 1

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合成硫酸软骨素钠是有机合成中的重要反应之一,具有一定的实验操作难度和技术挑战。


简述:硫酸软骨素钠系自猪的喉骨、鼻中骨、气管等软骨组织提取制得的硫酸化链状黏多糖钠盐;具有促进软骨再生,抗炎、降血脂、抗凝血活性的功效,能有效预防关节炎,近年来还发现其具有抗癌、抗HIV功效;硫酸软骨素钠为白色或类白色粉末;略带咸味;无臭;有引湿性。本品的水溶液具粘稠性,加热不凝结。

当前,硫酸软骨素的提取方法包括中性盐提取法、碱提法、酶解法、碱提酶解法等多种方式。这些方法各有特点和优点,但普遍存在的问题是提取得到的硫酸软骨素中杂质含量较高。


合成优化:

包括以下步骤:将软骨原料加水蒸煮并剔除软骨原料上的杂质,然后将软骨原料粉碎,得软骨粉末;向软骨粉末中加入碱液,搅拌反应,然后向其中滴加酸液至溶液呈中性,最后离心收集上清液;向上清液中加入复合酶溶液进行酶解反应,然后灭酶,然后向溶液中添加2,4-二硝基氟苯,搅拌,离心收集上清液;采用阴离子树脂对上清液进行吸附,然后洗脱,收集洗脱液;向洗脱液中加入无水乙醇,搅拌,离心收集沉淀,然后进行真空冷冻干燥,制得。具体实验操作如下:


(1)将100kg软骨原料加水于100℃条件下蒸煮20min,剔除软骨原料上的杂质,然后将软骨原料粉碎,得软骨粉末;


(2)向软骨粉末中加入碱液调节pH值为9,于40℃条件下搅拌反应6h,然后向其中滴加酸液至溶液呈中性,最后离心收集上清液;


(3)向上清液中加入复合酶溶液进行酶解反应,复合酶的用量占软骨质量的0.4%,复合酶溶液包括蛋白酶和肽酶,蛋白酶和肽酶的比例为1:6;蛋白酶包括胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的比例关系为1:1;然后灭酶,然后向溶液中添加2,4-二硝基氟苯,2,4-二硝基氟苯的用量占软骨重量的1‰,搅拌,离心收集上清液;


(4)采用阴离子树脂对上清液进行吸附,然后用去离子水洗脱,收集洗脱液;


(5)将洗脱液中加入等于洗脱液体积两倍的无水乙醇,搅拌4小时后,进行离心以收集沉淀。随后进行真空冷冻干燥,具体操作步骤为:首先在-20℃条件下冷冻2小时,然后以每分钟3摄氏度的速度升温至0℃,进行1小时的干燥;接着以每分钟5摄氏度的速度升温至40℃,进行3小时的干燥;最后以每分钟2摄氏度的速度升温至60℃,进行2小时的干燥,从而制得8.84千克的硫酸软骨素。


参考文献:

[1] 嘉兴恒杰生物制药股份有限公司. 一种硫酸软骨素钠的生产方法及设备. 2023-09-01.

[2] 四川菲德力制药有限公司. 一种硫酸软骨素钠及其制备方法. 2022-11-01.

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