如何使用双抗体夹心法测定血管紧张素Ⅰ水平? ¹

实验原理^[1]

本试剂盒利用双抗体夹心法来测定标本中的血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)水平。首先，将纯化的血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)抗体包被在微孔板上，形成固相抗体。然后，依次加入血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)样本和HRP标记的血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)抗体，使其结合形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色反应。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，经酸作用后转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)浓度呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中的血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)浓度。

试剂盒组成

使用注意事项^[1]

1．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

2．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

5．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．不同批号的试剂盒组分不得混用。

10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

主要参考文献

[1]夏璐，马旭，朱清；连续性血液净化对重症急性胰腺炎患者肾素-血管紧张素-醛固酮系统及炎性指标的影响。  《中国全科医学》。