本文介绍了一种利用双抗体夹心法测定标本中小鼠凋亡诱导因子(AIF)水平的方法。该方法利用纯化的凋亡诱导因子(AIF)抗体包被微孔板，形成固相抗体。然后将凋亡诱导因子(AIF)样本加入包被单抗的微孔中，并与HRP标记的凋亡诱导因子(AIF)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB进行显色。根据颜色的深浅和样品中的凋亡诱导因子(AIF)水平的正相关关系，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），并通过标准曲线计算样品中凋亡诱导因子(AIF)的浓度。
1. 浓洗涤液可能会结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
2. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
5. 每次测定时请制作标准曲线，最好做复孔。如样本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（n × 5）。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8. 所有样品、洗涤液和废弃物都应按传染物处理。
9. 不同批号的试剂盒组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
[1] 兰少伟；凋亡诱导因子(AIF)在小鼠毛囊周期中的表达调控研究。《吉林大学》
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