脱氧核糖核酸酶2抗体的应用及特性？ ¹

背景^[1-3]

脱氧核糖核酸酶2抗体是一种多克隆抗体，具有特异性结合脱氧核糖核酸酶2的能力。它主要用于免疫学实验中检测脱氧核糖核酸酶2的存在。脱氧核糖核酸（DNA）是生物细胞内的一种核酸，携带着合成RNA和蛋白质所需的遗传信息，对生物体的发育和正常运作至关重要。

脱氧核糖核酸酶，也被称为DNA酶，是一种灰色至类白色粉末。它可以从蛋白样品中去除DNA，但无法水解紧密的核染色质。

脱氧核糖核酸（DNA）是生物细胞内的一种核酸，是生物体发育和正常运作所必需的生物大分子。

DNA由脱氧核苷酸组成，每个脱氧核苷酸由碱基、脱氧核糖和磷酸构成。碱基有四种类型：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）。

在DNA分子的结构中，两条多脱氧核苷酸链围绕着一个共同的中心轴盘旋，形成双螺旋结构。脱氧核糖-磷酸链位于螺旋结构的外部，而碱基朝向内部。两条多脱氧核苷酸链是反向互补的，通过碱基间的氢键形成稳定的碱基配对。

应用^[4][5]

旋毛虫新生幼虫脱氧核糖核酸酶Ⅱ的表达和鉴定研究

通过筛选旋毛虫新生幼虫差减cDNA文库，发现了一个特异性表达基因N5，该基因可能编码脱氧核糖核酸酶Ⅱ（DNaseⅡ）。

研究人员构建了原核表达载体pET28a-N5，并将其转化到表达菌E.coli BL21（DE3）中。通过不同的诱导条件对重组表达菌进行诱导，然后对菌体裂解物进行分析。结果显示，在不同的诱导条件下，表达量有所不同。

研究人员利用尿素提取包涵体法提取不同条件下表达的包涵体，并进行复性。然后，使用复性后的上清液对DNA进行酶切分析，结果表明复性后的包涵体上清液具有较强的核酸酶活性。

通过对N5基因序列的分析以及将N5与其他物种的脱氧核糖核酸酶Ⅱ基因进行比对，研究人员发现N5基因属于编码脱氧核糖核酸酶Ⅱ基因家族成员。此外，他们还找到了N5基因编码活性中心氨基酸和关键氨基酸的碱基序列。通过PCR进行定点突变，将编码关键氨基酸-组氨酸的密码子分别突变为编码赖氨酸和丝氨酸的密码子。

突变后，研究人员同样构建了原核表达载体pET28a-MC578A-29和pET28a-MC578B-29，并进行诱导表达和酶活性测定。结果显示，突变后所编码的蛋白的核酸酶活性明显下降或丧失。

综上所述，通过对N5和突变后的基因的表达产物进行酶活分析，证明了N5基因编码的脱氧核糖核酸酶具有DNaseⅡ的特性。

参考文献

[1] Hui-Hui Liu, Yi-Ran Yang, Xin-Cheng Shen, Zhi-Ling Zhang, Ping Shen, Zhi-Xiong Xie. Role of DNA in Bacterial Aggregation. Current Microbiology. 2008(2).

[2] Tissue distribution of neutral deoxyribonuclease (DNase) activity in the mussel Mytilus galloprovincialis. Comparative Biochemistry and Physiology, Part B. 2007(3).

[3] Characterization and tissue distribution of multiple agouti-family genes in pufferfish, Takifugu rubripes. Tadahide Kurokawa, Koji Murashita, Susumu Uji. Peptides. 2006(12).

[4] DNase II deficiency impairs innate immune function in Drosophila. Chang-Soo Seong, Armando Varela-Ramirez, Renato J. Aguilera. Cellular Immunology. 2006(1).

[5] 龙民慧. 旋毛虫新生幼虫脱氧核糖核酸酶Ⅱ表达及鉴定[D]. 吉林大学, 2005.