为了表明具有高样品载荷容量的微粒硅胶可用于半制备规模的液相色谱分离，我们使用了制备色谱法。
所需设备：两个恒流泵或恒压泵、UV检测器、RI检测器。
我们使用了Waters Associates ALC/GPC244型液相色谱仪，包括两个M6000A型溶剂供输系统和M660程序器，以及Waters Associates 440型UV检测器(254纤米)和Waters Associates 示差折光计。
柱系统：我们使用了三根300毫米×4毫米内径柱，填充以10微米Pora-sil。
注样系统：我们使用了样品环管进样阀和注射器柱头进样型式，以及Waters Associates U6K型无隔片注样器。
流动相：我们使用了氯仿和异辛烷。
样品：我们使用了四种增塑剂，即酞酸二甲酯、二乙酯、二正丁酯、二正辛酯。
辅助设备：我们使用了样品收集器。
操作步骤：为了实现四种增塑剂的最佳分离，我们使用了低样品载荷量(<0.1亳克)以获得最大的基线分辨率。这一分离是通过"溶剂探索"技术完成的，使用了两套M6000A溶剂供输系统和溶剂程序器；其中一个泵供输氯仿，另一个泵供输异辛烷。对于所用柱系统的最佳溶剂组成是20%氯仿和180%异辛烷(V/V)。
在制备操作中，我们先在外部配制了这一溶剂组成，然后用一个泵注入柱系统。柱的流出液由两个串联的检测器(UV和RI检测器)进行监控。我们连续增加注入的增塑剂样品量，直到达到样品载荷限度。对于所用的系统，这一样品量约为四种组分共35毫克；超过这一水平，样品就会重叠，样品在流动相中的溶解度和在柱上的超载都起到限制作用。我们收集的样品级分再行展开，以观察所收集各峰的纯度。
结果：图13-50表示我们所达到的分析分离效果。请参考下一个实验中样品量对于分离的影响。对收集的样品进行分析，表明其纯度至少为99%。
结论：这一实验表明，将几根分析柱串联，可以顺利地进行半制备规模的分离和收集。对于分析分离只需一根柱即已够用，而将这些柱串联起来，应用常规分析技术进行二到三次操作，就可收集到足够纯的样品。
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