EDTA抗凝血直接PCR试剂盒采用独特的PCR缓冲液体系,无需DNA提取或样品处理即可直接进行全血样本的PCR扩增。不仅可以使用EDTA和Heparin抗凝全血作为模板,还可以使用含有血液的采集卡进行PCR扩增。这大大缩短了检测时间。试剂盒中的2×Super EasyTM Mix具有很强的抑制物耐受性,可以灵敏地扩增血液样本中的基因组和外源目的DNA片段。
2×Super EasyTM Mix(UNG)是在2×Super EasyTM Mix的基础上使用dUTP替代dTTP,并加入能够降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前,利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物,保证扩增的特异性和准确性,防止PCR产物污染问题。
Taq DNA polymerase是Foregene专门研制的DNA polymerase,对多种PCR反应抑制剂具有极强的耐受性,可以高效扩增痕量的DNA,扩增速度快,特别适合直接PCR反应。
通过比较ITP患者和SLE患者外周血细胞中微小RNAs(microRNAs,miRNAs)的差异表达,可以发现ITP患者存在特异性miRNA表达,从而可以在疾病早期区分ITP和SLE。
研究方法:从ITP患者和SLE患者各抽取外周静脉血样本,经过离心法分离外周血单个核细胞,提取总RNA。使用miRCURYTMHy3/Hy5试剂盒标记miRNA,并进行miRNA杂交。通过芯片扫描和分析,筛选出差异表达的miRNA,并进行RT-PCR验证。
研究结果:在ITP和SLE组的外周血白细胞中发现了121个差异表达的miRNAs,其中55个miRNAs仅在ITP组中表达,56个miRNAs仅在SLE组中表达,10个miRNAs在ITP和SLE组中表达相反。分层聚类分析显示ITP和SLE存在特异性miRNA表达谱。
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