苦参是一种豆科槐属植物,其干燥根具有清热燥湿、杀虫、利尿等功效。苦参主要含有生物碱和黄酮成分,其中异苦参酮是一种重要的黄酮成分。
1. 准备仪器和试剂
1.1 使用HP-1100型高效液相色谱仪,VWD紫外检测器和ZB-2010色谱工作站。
1.2 使用甲醇作为色谱纯试剂,其他试剂为分析纯,使用纯化水。同时准备异苦参酮对照品和苦参药材样品。
2. 进行方法与结果
2.1 设置色谱条件,使用Hypersil C18色谱柱,甲醇-水为流动相,流速为0.7 mL/min,检测波长为287 nm,柱温为35℃,进样量为10 μL。
2.2 制备供试品溶液,将苦参粉末与甲醇-水溶液混合,过滤后得到供试品溶液。
2.3 进行对照品和样品的色谱图测定,结果显示异苦参酮的出峰时间约为9.62 min,能与样品中其他成分很好地分离。
2.4 进行线性关系考察,得到回归方程为Y = 711.6472X + 14.5444,进样量线性范围为0.4668~2.3340 μg。
2.5 进行精密度和稳定性试验,结果显示样品和对照品的RSD分别为1.04%和0.89%,溶液在24小时内保持稳定。
2.6 进行重复性试验,测得苦参样品的平均含量为0.58%,RSD为0.86%。
2.7 进行加样回收试验,结果显示异苦参酮的平均回收率为95.63%,RSD为1.2%。
2.8 进行样品含量测定,按照外标法以峰面积计算样品的含量。
[1] 彭远松,易晴仁.高效液相色谱法测定苦参中异苦参酮的含量[J].医药导报,2005(04):335-336.