生物样品需要保持在特定的酸碱范围内，而生物缓冲剂可以起到这种作用。二(2-羟乙基)亚氨基三(羟甲基)甲烷是一种常用的生物缓冲剂，它具有比一般缓冲液更低的中性缓冲范围。它可以用于电泳缓冲液对DNA、RNA、蛋白质等的分离分析，以及内毒素含量和食品成分含量的检测。中性的缓冲范围有利于电泳凝胶的稳定，同时也有利于大分子的稳定。
本发明提供了一种制备二(2-羟乙基)亚氨基三(羟甲基)甲烷的方法。该方法采用阴离子树脂作为催化剂，碳酸乙烯酯和三羟甲基氨基甲烷作为起始原料，在适当的温度和时间下进行反应。
具体步骤如下：
步骤①：在反应容器中加入水和三羟甲基氨基甲烷，加热搅拌。
步骤②：升温后加入阴离子树脂，并滴加熔融的碳酸乙烯酯。
步骤③：待反应停止后，将反应液过滤除去阴离子树脂，用纯水清洗。
步骤④：采用NaOH溶液对滤液进行pH值调整，然后进行减压、脱水，得到油状物。
步骤⑤：用乙醇溶解，冷却析出晶体，过滤得粗产品。
步骤⑥：对粗产品用乙醇重结晶，干燥得到产物。
本发明的优点在于原料稳定，操作方便，毒性低，对环境友好。同时，在阴离子催化剂的作用下，反应产率高，工艺简单。
根据本发明的制备方法，可以按照以下步骤进行：
1. 在1000ml四颈瓶中加入100ml水和120g三羟甲基氨基甲烷，加热搅拌。
2. 当温度升至80°C时，加入25g阴离子树脂，并滴加200g熔融的碳酸乙烯酯。
3. 保持温度80°C反应20小时后，停止反应。
4. 将反应液过滤除去阴离子树脂，用纯水清洗。
5. 采用30%的NaOH溶液将滤液调至pH9.5左右，然后进行减压至0.08MPa，在78°C-100°C的温度下进行脱水，得到油状物。
6. 用乙醇溶解油状物，冷却析出晶体，过滤得粗产品。
7. 对粗产品用乙醇重结晶，干燥得到白色晶体。
根据实验结果，本发明的产率为42.4%。
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