蟾酥中的蟾毒配基成分的测定是中药研究中的重要课题。针对这一问题，本文将探讨有效的测定方法和技术。
简述：蟾酥(Bufonis Venenum)为蟾蜍科动物中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans Cantor)或黑眶蟾蜍(Bufo melanostictus Schneider)的耳后腺和皮肤腺体的干燥分泌物，具有解毒、止痛、开窍醒神等传统功效。蟾酥主要分布于河北、山东、江苏、浙江等地，以山东临沂和江苏南通最为著名。
1. 报道一
李芳洁等人建立了HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分(伪异沙蟾毒精、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、脂蟾毒精、南美蟾毒精、蟾毒灵、脂蟾毒配基和华蟾酥毒基)的含量。方法:采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18色谱柱(150 mm×3.0 mm 2.7μm)，以0.3%乙酸水溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱，流速为0.5 mL·min-1，柱温为30℃，检测波长为296 nm。
结果表现为：11个蟾毒配基成分的线性范围分别为2.024～20.24μg·mL-1(r=0.999 8)、18.44～184.4μg·mL-1(r=0.999 9)、12.40～124.0μg·mL-1(r=0.999 5)、3.720～37.20μg·mL-1(r=0.999 5)、10.28～102.8μg·mL-1(r=0.999 8)、22.16～221.6μg·mL-1(r=0.999 7)、3.280～32.80μg·mL-1(r=0.999 4)、5.440～54.40μg·mL-1(r=0.999 7)、28.84～288.4μg·mL-1(r=0.999 8)、32.76～327.6μg·mL-1(r=0.999 7)、71.28～712.8μg·mL-1(r=0.999 6)，方法的精密度(RSD≤1.3%)、重复性(RSD≤4.4%)、稳定性(RSD≤3.3%)良好，平均加样回收率为95.6%～102.4%，RSD为0.98%～4.4%。18批次蟾酥样品中伪异沙蟾毒精、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、脂蟾毒精、南美蟾毒精、蟾毒灵、脂蟾毒配基和华蟾酥毒基的含量范围分别为0.285 0～1.018、11.89～14.12、9.246～10.98、2.260～2.739、6.813～8.093、15.33～18.20、0.528 0～1.178、1.492～2.403、17.79～26.17、18.75～29.94、43.12～60.81 mg·g-1。聚类分析结果表明，18批次蟾酥样品可分为2类。该方法简便易行，重复性好，灵敏度高，可用于蟾酥的质量控制和品质评价。
2. 报道二
刘册家等人建立喉症丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法进行测定，Thermo C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.5%磷酸二氢钾(用磷酸调节pH=3.2)(40∶60)，流速1.0mL·min-1，检测波长296nm，柱温40℃，进样体积10μL。
该方法系统适应性良好，华蟾酥毒基、脂蟾毒配基分别在48.70～113.64μg·mL-1(r=0.999 8)和9.23～21.53μg·mL-1(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为101.1%(RSD=0.6%，n=6)、100.6%(RSD=0.1%，n=6)，该方法精密度良好，流速和柱温耐用性考察均符合要求。该方法简便准确、灵敏、重复性好，适用于喉症丸中蟾酥的质量控制。
3. 报道三
郭增光等人建立了HPLC法测定心可宁胶囊中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量测定方法，以更好的控制其质量。方法:采用Thermo C18色谱柱，以0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(50∶50)为流动相，用磷酸调pH至3.2，检测波长为296 nm。
华蟾酥毒基在30.7271.68μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=1.0000)，酯蟾毒配基在30.7871.82μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)，华蟾酥毒基和酯蟾毒配基平均回收率分别为99.76%和99.88%，RSD分别为1.29%和0.62%；测定3批样品，华蟾酥毒基和酯蟾毒配基总量分别为0.053、0.053、0.054 mg·粒-1，RSD为1.09%。该方法准确、有效，可以作为该类产品的质控检测方法。
4. 报道四
李志东等人建立了HPLC法测定麝香保心丸中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基的含量，并比较不同批次麝香保心丸中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基的含量差异。方法采用Welch Topsil CX-C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，以乙腈-0.5%磷酸二氢钾为流动相进行梯度洗脱；柱温为40℃；检测波长296nm；体积流量为1.0mL·min-1。四个批次药品中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基的含量均符合药典要求。该法灵敏度高，重复性好，能准确测定麝香保心丸中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基的含量，为蟾酥的限量检查提供参考依据。
参考文献：
[1]李芳洁,周成美,任鑫等. HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分的含量 [J]. 药物分析杂志, 2023, 43 (05): 739-747. DOI:10.16155/j.0254-1793.2023.05.03.
[2]刘册家,王真,刁瑞丽等. HPLC法测定喉症丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量 [J]. 亚太传统医药, 2019, 15 (04): 51-54.
[3]郭增光,罗晓倩,王丽娟等. 心可宁胶囊中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的HPLC法含量测定 [J]. 中国药品标准, 2017, 18 (06): 435-438. DOI:10.19778/j.chp.2017.06.007.
[4]李志东,朱士春,葛朝晖. HPLC法测定不同批次麝香保心丸中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基的含量 [J]. 海峡药学, 2017, 29 (12): 72-74.
1
