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DMEM低糖液体培养基的应用及制备方法? 1

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DMEM低糖液体培养基是一种适用于细胞培养的培养基,其保存条件为2-8°C,有效期为一年。该培养基的成分包括1000mg/L的D-葡萄糖、584mg/L的L-谷氨酰胺和3700mg/L的碳酸氢钠,pH值在7.0-7.4之间。

DMEM低糖液体培养基在治疗肠神经系统功能缺失或障碍中的应用

针对ENS功能障碍相关疾病目前缺乏有效的治疗体系,CN201510495593.8提供了一种利用骨髓基质干细胞制备神经修复材料来治疗肠神经系统功能缺失或障碍的方法。该方法通过将骨髓基质干细胞与含有神经胶质细胞源性神经营养因子的胎肠培养基共同培养预处理,得到神经修复材料,并将其注入患病受体内,从而促进消化道肠神经系统的神经再生和胃肠动力的恢复。

为了实现上述目的,本发明提供了一种骨髓基质干细胞在制备治疗肠神经系统功能缺失或障碍的神经修复材料中的应用方法。同时,本发明还提供了一种用于治疗肠神经系统功能缺失或障碍的神经修复材料的制备方法,该材料由骨髓基质干细胞、含有碱性成纤维细胞生长因子的DMEM低糖液体培养基和含有神经胶质细胞源性神经营养因子的胎肠培养基组成。

上述神经修复材料的制备方法包括以下步骤:

1) 取出15天大的SD孕鼠胚胎,进行常规麻醉后注射戊巴比妥钠;

2) 用无Ca2+,Mg2+的PBS清洗8-10条胎肠;

3) 使用胶原酶进行消化处理;

4) 将消化后的胎肠接种于含有纤连蛋白的DMEM低糖液体培养基中;

5) 收集培养液,离心并过滤,得到胎肠培养基;

6) 将胎肠培养基与DMEM低糖液体培养基按比例混合,并调整pH值为7.4,得到最终的胎肠培养基。

本发明的有益效果包括:

1) 通过使用经过预处理的BMSC制备的神经修复材料,可以治疗肠神经系统功能缺失或障碍,促进消化道肠神经系统的神经再生和胃肠动力的恢复。

2) 经过预处理的BMSC可以导致有效的神经再生,而未经处理的BMSC则无法实现有效的神经再生。体内外实验证明,BMSC可能通过影响神经胶质细胞源性的神经营养因子正反馈机制来促进神经再生。

3) 本发明提供的神经修复材料制备方法可用于治疗胃肠道肠神经系统疾病,并可在其他神经损伤相关疾病的修复应用中有效使用。

主要参考资料

[1] DMEM低糖液体培养基说明书

[2] CN201510495593.8骨髓基质干细胞在制备治疗肠神经系统功能缺失或障碍的神经修复材料中的应用

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