瑞卡帕布的生物活性及实验方法？ ¹

瑞卡帕布（Rucaparib），又名AG-014699或PF-01367338，是一种RARP的抑制剂，对PARP1的Ki为1.4 nM，并且对其他八个PARP结构域也有结合亲和力。那么瑞卡帕布的生物活性是什么？如何进行实验呢？下面将详细说明。

瑞卡帕布的生物活性

1）体外活性

瑞卡帕布是PARP抑制剂中最有效的酶测定物质（Ki为1.4 nM），可能是AG14644的N-去甲基化代谢物。瑞卡帕布通过抑制NF-κB活化的下游，实现放射增敏作用，并且与SSB修复抑制无关。它可以靶向由DNA损伤激活的NF-κB，并且不会损害其他重要的炎症功能。在透化的D283Med细胞中，瑞卡帕布在浓度为1μM时可以抑制PARP-1活性97.1％。

2）体内活性

瑞卡帕布和AG14584显著增加替莫唑胺的毒性。瑞卡帕布（1 mg / kg）显著增加替莫唑胺引起的体重减轻。瑞卡帕布（0.1 mg / kg）导致替莫唑胺诱导的肿瘤生长延迟增加50％。瑞卡帕布在DNA修复蛋白质感受力的D384Med异种移植物中显著增强替莫唑胺诱导的TGD。药代动力学研究还表明瑞卡帕布在脑组织中被检测到，这表明瑞卡帕布在颅内恶性肿瘤治疗中具有潜力。瑞卡帕布显著增强拓扑替康和替莫唑胺在NB-1691，SH-SY-5Y和SKNBE（2c）细胞中的细胞毒性。

瑞卡帕布的实验方法

我们可以通过以下三种方法进行活性实验：

1）细胞实验：将成神经管细胞瘤细胞系以不同密度接种在96孔板中，暴露于不同浓度的替莫唑胺，并通过XTT细胞增殖试剂盒评估细胞活力。

2）动物实验：口服给予单剂量的替莫唑胺，单独使用或与PARP抑制剂瑞卡帕布组合使用。

3）激酶实验：使用不同浓度的瑞卡帕布测量D28383Med细胞中PARP活性的抑制。

综上所述，瑞卡帕布是一种有效可口服的PARP抑制剂，具有对PARP1的高亲和力（Ki为1.4 nM），并且对其他PARP亚型也有结合能力。