中性红(Neutral red)是一种用于活细胞和酸碱度测定的指示剂。它是一种深绿色结晶粉末,分子式为C15H17ClN4,分子量为288.7753。中性红易溶于水和醇,水溶液呈红色,醇溶液呈黄色。
中性红是一种弱碱性pH指示剂,变色范围在pH6.4~8.0之间(由红变黄)。它也是一种弱阳离子的分子。中性红溶液可用于染色细胞中的液泡(主要是植物细胞),以鉴定细胞的生死状态。活细胞会被染成红色,而死细胞则不会变色。与台盼蓝相反,中性红也可用于检测动物细胞的活性。在进行病毒相关实验时,常需要使用中性红染色来识别空斑。
中性红在细胞活性或毒力检测方面有广泛的应用。以下是12个可以应用中性红的方面:
以下是一些组织中性红染色的图片:
第一排是正常细胞,第二排是经过不同浓度的氯化锌处理的SY5Y细胞的样子和中性红分布情况。
活细胞的染色原理如下:
在正常细胞中,胞浆大部分呈淡粉色,其中有蓝色的泡状结构和类似铁锈的深红色物质。这是因为中性红是一种弱阳离子的分子,可以通过被动扩散方式穿过细胞膜进入细胞,然后在溶酶体中聚集。中性红的吸收依赖于细胞产生ATP维持pH梯度的能力。在生理pH值下,染料呈接近零的净电荷,使其能够穿透细胞膜。染料在溶酶体中聚集是因为溶酶体是一个酸性液泡,基质中含有许多阴离子。中性红与溶酶体基质中的阴离子以非静电模式结合,使染料带电并保留在溶酶体内。
来源:果子学生信