M-MLV 逆转录酶是一种特殊的重组DNA聚合酶,它能够以单链RNA、DNA或RNA:DNA杂交体为模板,合成互补的DNA链。相比于AMV RT,莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶(M-MLV RT)缺乏DNA核酸内切酶活性,并且其RNase H活性较低。
与普通的M-MLV 逆转录酶相比,缺失了Ribonuclease H (RNase H)酶活性的M-MLV 逆转录酶(RNase H-)无法选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA,但它可以合成长片段的DNA。
M-MLV 逆转录酶(RNase H-)具有合成长达9~13kb的cDNA的能力。该反转录酶在42~45℃时表现出最佳反应温度,在55℃时仍然保持高活性,这可以避免普通的M-MLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
用途:
M-MLV 逆转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后合成cDNA的第一条链。合成的cDNA第一条链可以进一步用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等应用。