普通的内参，如actin、GAPDH等和非磷酸化的抗体都要做。普通内参保证了western操作电泳上样量一致，排除体系本身的影响。将磷酸化抗体的结果和非磷酸化抗体的结果的比值作为某种刺激（药物作用）对信号通路中某种酶磷酸化程度的影响，这种表述实验结果的方法是最客观的，也是必需的。如果不做普通内参，不能说明最后实验结果（磷酸化抗体检测目的蛋白的变化）是因上样量不同而致还是因药物（外界刺激）作用而致。如果不做非磷酸化抗体，也可能本身药物（外界刺激）作用能够导致该蛋白量和磷酸化程度都有改变，对这种双重改变表现不出来，会直接影响后续结果的分析。多多交流！
