在1994年和1996年，美国Jahng和Wood发表了以OB3b菌为背景的基因工程菌降解三氯乙烯和氯仿的研究结果。然而，由于构建的基因工程菌活性极低，他们认为该基因工程菌可能没有活性。2002年，Wood在Microbiol. Comm.上发表文章指出，之前的判断可能有误。他们认为，第一个以菌株OB3b为背景构建的Psudomonas Putida F1是有活性的，对三氯乙烯的降解活性为5nmol/(min.mg)。而在1996年的报道中，虽然对三氯乙烯的降解率只为6~8μmol/(L.5h)，但也有相应量的氯化物产生。第二个证据是MMO缺失型P. Putida F1，在甲苯不足的葡萄糖培养液中生长，不能表达甲苯双加氧酶，故P. Puida F1菌株也不能降解三氯乙烯，而含sMMO的基因工程菌P. Putida F1是能够降解三氯乙烯的。这就证明了sMMO的活性可以进行成功表达。1996年的报道还表明，来自于OB3b的sMMO重组基因，在P. Putida F1、Agrobacterium tumefaoiens A114和Rhizobium meliloti 102F34三个不同宿主中表达，采用标准的MMO活性分析方法，测定它们的粗提取液对丙烯环氧化的活性，也得到类似结果。因此可以断言，在1994年和1996年的报道中，基因重组的sMMO虽然活性极低，但毕竟还是有活性，应该是可溶性甲烷单加氧酶基因的首次成功表达。
在2003年日本京都大学理工研究所年报中，Fukuda等报道了来自Meth-ylocystis sp. M菌株的羟基化酶基因高效表达结果。根据所报道的Methylo-cystis sp. M菌株的基因序列信息，PCR扩增了羟基化酶的亚基，并将其克隆到PET质粒系统，表达在E.coli中。a、β亚基是以携带组氨酸标签的包涵体形式表达的，γ亚基是以溶解形式表达的，在E.coli中超过50%的总蛋白为a、β亚基。1999年，Lloyd报道了sMMO基因在M. tricbosporium的sMMO缺失型菌株中表达，其活性为140nmol/(L..min) (丙烯环氧化测定法)，这一结果比野生菌活性提高了三倍。由此证明，在同源宿主中表达，其活性可比在异源宿主中表达高很多。
目前，来自于OB3b的sMMO基因，在Meth ylomicrobium album BG8和Meth. ylocystisparvus OBBP这两个sMMO缺失型菌株中没有获得成功表达。但这两个宿主仍被认为是表达sMMO的最好宿主，因为它们的亲缘性很近，可能含有使蛋白质正确折叠的组装蛋白。通过含有相同启动子的宽宿主范围质粒，转人到该宿主细胞中，有可能得到高活性sMMO表达。使用sMMO缺失型OB3b的突变菌株可以同源表达sMMO基因，尽管突变菌株的获得非常困难，但还是解决MMO基因工程菌活性较低的方法之一。将卡那霉素标记插入到染色体的MMOX基因中，用来交换标记的突变菌株，已经可以用于产生突变的sMMO，该突变菌株表现出sMMO缺失。pMMO呈阳性显性，这个重组的质粒载体是PVR100Sc，它含有天然的启动子和sMMO操纵子，被成功构建后表现为sMMO阳性显性。在野生的OB3b中，Cu2+大于0.25pmol/L就抑制了sMMO的活性，而将重组质粒PVR100Sc转导人sMMO缺失型的OB3b宿主中，这个重组的基因工程菌表现子对Cu2+的不敏感性；Cu2+大于0.75pumol/L时，sMMO仍然可以稳定表达。在该条件下，添加过量的还原酶后，sMMO仅仅在无细胞提取液中才能被检测到，因为Cu2+在细胞外抑制了还原酶的活性。在高Cu2+浓度的基因工程菌中，sMMO能够稳定表达，可能是由于增加了携带在质粒PVR100Sc上的基因拷贝数，这也是唯一篇有关重组菌与野生菌具有相同活性的报道。在低Cu2+浓度时，重组菌的活性是野生菌的3倍，这就表明，有可能利用此系统进行sMMO的原位突变和构效关系研究。使用T7聚合酶表达系统，宿主为大肠杆菌，表达sMMO的组分B和还原酶，其表达产物是有活性的，而表达羟基化酶时活性极低，几乎没有活性。分析原因，有可能是在异型宿主中，没有酶的后期组装蛋白所引起的。
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