DNA甲基化的重要性及检测方法？ ¹

DNA甲基化是一种通过DNA甲基化酶修饰DNA分子碱基上的甲基基团的过程。甲基化后的特定碱基不再受限制性内切酶切割。DNA甲基化在维持细胞功能、传递基因组印记、胚胎发育和肿瘤发生等方面起着重要作用。蛋白质富集全基因组甲基化测序（MBD-Seq）是一种检测DNA甲基化的方法，通过甲基化DNA富集和高通量测序来检测全基因组范围内的甲基化位点。

如何进行DNA甲基化测序

技术参数

样品要求

1) 样品质量：OD 260/280值应在1.8～2.0之间，无RNA污染，无降解。

2) 样品浓度：最低浓度不低于50ng/μl。

3) 样品总量：每个样品总量不少于15μg。

4) 样品溶剂：要溶解在无菌的10 mM TirsHCl，1mM EDTAE (pH 8.0)溶液中，经过65°C 10分钟处理。

5) 样品运输：DNA低温运输（-20℃），在运输过程中请用parafilm将管口密封好，以防出现污染。

应用

非小细胞肺癌（NSCLC）是一个复杂的恶性肿瘤，DNA甲基化是其预后和治疗的重要机制。研究者采用了NSCLC样本和对照组肺组织进行全基因组DNA甲基化分析，结合MethylCap和高通量测序（MBD-seq），以提供全面的肿瘤和对照组肺标本的DNA甲基化图谱。结果表明，重复实验内及实验组和对照组间的MethylCap-Seq数据均显示很强的正相关性。

参考文献

[1] 英汉互查肿瘤学词汇

[2] MBD甲基化测序技术说明书