过氧化物酶染色的应用及操作步骤？ ¹

过氧化物酶(POX)是一种重要的细胞化学染色方法，用于辅助判断急性白血病细胞类型。目前最常用的方法是四甲基联苯胺法-过氧化物酶染色液(联苯胺法)。过氧化物酶是一种能催化多种反应的酶，主要存在于细胞的过氧化物酶体中，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的作用。

染色原理

过氧化物酶染色液(联苯胺法)是一种常用的POX染色液。其原理是细胞内的过氧化物酶能将无色的3，3-二氨基联苯胺(DAB)的氢原子传递给过氧化氢，使其催化成有色染料沉积在细胞质中的POX所在部位。

操作步骤

1、将血液、骨髓或细胞涂片滴加预冷的BFA固定液，进行固定。

2、滴加配制好的POX孵育液，室温避光孵育。

3、滴加WG染色液，进行染色。

4、滴加等量的WGbuffer，继续染色。

5、进行水洗、晾干、镜检。

注意事项

1、血液或骨髓涂片应新鲜，薄厚适宜，及时固定，以保持酶的活性。

2、POX孵育液应即配即用，不宜久置，以免失效或降低阳性强度。

3、样本在未染色前切勿接触氧化剂类物质，以免抑制细胞内的过氧化物酶。

4、每次染色时，应使用健康人末梢血或骨髓涂片作为阴性对照。

参考资料

[1] 过氧化物酶染色的质量控制

[2] 过氧化物酶染色液(联苯胺法)使用说明