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为什么MEK1/2磷酸话以后只有1个条带,不像ERK1/2有2条?

我看一些文献,里面MEK1/2磷酸话以后只有1个条带,既然是2个磷酸化位点,为什么只有1个条带,不像ERK1/2有2条?谢谢指点!


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MEK1/2这两个激酶的氨基酸数目差不多,分别是:
MEK1
ORIGIN
1 mpkkkptpiq lnpapdgsav ngtssaetnl ealqkkleel eldeqqrkrl eafltqkqkv
61 gelkdddfek iselgagngg vvfkvshkps glvmarklih leikpairnq iirelqvlhe
121 cnspyivgfy gafysdgeis icmehmdggs ldqvlkkagr ipeqilgkvs iavikgltyl
181 rekhkimhrd vkpsnilvns rgeiklcdfg vsgqlidsma nsfvgtrsym sperlqgthy
241 svqsdiwsmg lslvemavgr ypipppdake lelmfgcqve gdaaetpprp rtpgrplssy
301 gmdsrppmai felldyivne pppklpsgvf slefqdfvnk cliknpaera dlkqlmvhaf
361 ikrsdaeevd fagwlcstig lnqpstptha agv
MEK2
ORIGIN
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61 kakvgelkdd dferiselga gnggvvtkvq hrpsglimar klihleikpa irnqiirelq
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241 gthysvqsdi wsmglslvel avgrypippp dakeleaifg rpvvdgeege phsisprprp
301 pgrpvsghgm dsrpamaife lldyivnepp pklpngvftp dfqefvnkcl iknpaeradl
361 kmltnhtfik rseveevdfa gwlcktlrln qpgtptrtav
所以它们的分子量也相差无几.且磷酸化都是在两个位点.所以磷酸化之后的状态也没有什么区别.在条带上就显示出一条带.而ERK1/2它们的分子量分别为44KD和42KD,区别较大,所以显示出两条带.MEK1/2的两个磷酸化位点是同时磷酸化的,不可能有的磷酸化,有的不磷酸化.它们的上游激酶是ser/Thr激酶.
p-ERK1/2之所以有两条带是因为它们的分子量的差异.
总ERK1/2的条带只能说明细胞内这两种激酶的量的多少,而不能说明它们的活化程度.只有P-ERK1/2才能说明其活化程度.
一般情况下,这两种量的表示都要检测.测定总ERK1/2的量在于说明你的处理组和对照组中ERK1/2的表达量有无改变,而P-ERK1/2量的改变则说明他们的激活状态.
 ERK1/2分别是44kD和42kD的蛋白质,两个磷酸接受位点酪氨酸和苏氨酸被磷酸化后使激酶活化,其在ERK1/2的活化环中被一个谷氨酸残基隔开,形成TFY序列。ERK1/2广泛存在,在某种程度上它们被多种配体和细胞外界刺激所激活,具有细胞种类特异性,不同的细胞可能出现不同的磷酸化结果,有的可激活44KD,有的激活42KD,只看到一条带子也可能是正常的,还可以出现一条带子亮一条带子暗的结果,所以你要遵循客观结果。
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