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snail为什么发出两条带?

用的是cst的抗体,snail分子量应该是29,但是发出来的两条带都在25~35之间,上面那条带很靠近35,但发出来颜色很深,下面那条带貌似是29,但是颜色很淡很淡,理论上我需要一个上调的结果,也就是上面那条带,但是分子量不对啊,求大神指导。



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共3个回答
snail蛋白会被磷酸化修饰,会引起分子量的一些改变,有文章报道在可以检测到两个snail条带,分别是非磷酸化的以及磷酸化的。但是像你这样分离的这么远的,比较少见。就我自己的经验来看,你上面的那条比较像snail的条带。 
snail被磷酸化之后,会从核内出来,并被泛素化,你检测到的比较大的分子量的条带可能是被泛素化的snail蛋白,个人意见,仅供参考。
某一个细胞有多条条带无法区分时,最好的方法是用另一种只有一条带的细胞一起跑胶做阳性对照。
你确定抗体的特异性好吗?三个可能原因,Marker条带不准,抗体特异性不好,杂的不是目的条带你的目的蛋白在细胞内发生修饰或剪切。建议使用抗体前应先在不同样本中验证一下抗体的特异性,确定抗体好用后再使用。
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