细胞转染的质粒如何稀释?

做细胞转染，同时订购了同一基因的过表达和下调质粒，希望通过同时转染这两种质粒至293T细胞内来筛选下调靶点，但是具体操作不是很清楚，有以下几个问题：1.两种质粒是分别稀释还是同时稀释？2.质粒用量、比例？如果哪位老师做过同样的实验，希望可以提供较为详尽的protocol~不胜感激~~~

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共4个回答

质粒如何稀释我不清楚，想知道老师用的什么试剂盒呢？我师兄用过RFect的说还不错，我想看看其他的效果怎么样？

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好问题。我们一般1:3-5（shRNA），可以达到很好的效果。希望有帮助。

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2ug的DNA（相信你会算啦）总量用3-5ul的LF2000。共转染当然是一起加到optimem混匀啦！

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一般设立DNA和shRNA-control对照就可以了。我们一般在HEK293FT细胞证明有70%的KD效率后就可以选择用于实验。请注意在HEK293FT中验证有效的，不一定在你靶细胞都有效。

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