如何配制磷钼酸(PMA)显色剂?
将10克磷钼酸和100毫升乙醇混合。
该显色剂呈淡黄色,久置后会变为浅绿色,但不会影响使用。在浸板或喷板上加热后,背景呈浅黄色,还原性物质会显现蓝绿色斑点。如果斑点过浓,可能会呈现深黄色。
该显色剂适用于含有共轭基团的化合物和芳香化合物。
具体适用范围如下:
1. 用于蛋白质的颜色反应(福林反应):该反应是酚基的酪氨酸与磷钼酸和磷钨酸的反应,呈现蓝色。主要用于蛋白质的定量分析。
2. 用于木脂素的非特征理化鉴别:使用5%磷钼酸乙醇液(105度,2-3分钟),可用于薄层层析显色。
3. 生物碱的沉淀反应:磷钼酸试剂与生物碱反应会生成白色或淡黄色沉淀。
4. 可与三萜类成分如齐墩果酸等反应:将样品喷洒磷钼酸乙醇溶液(100度,5分钟)进行显色,然后在120℃加热数分钟。
5. 黄酮类化合物的颜色反应:二氢黄酮与磷钼酸试剂反应会呈现棕褐色,可用作二氢黄酮类化合物的特征鉴别反应。